FLAG-PIPPH557A在小鼠1-细胞期受精卵中对PKB/Akt表达的调节作用

摘要

目的:研究富舍脯氨酸的肌醇多磷酸5-磷酸酶(proline-rich inositol polyphosphate 5phosphatase,PIPP)在组氨酸557位点突变为丙氨酸(FLAG-PIPP<'H557A>)时对小鼠受精卵中磷酸化苏氨酸蛋白激酶(pAkt)的影响.方法:将FLAG-PIPP<'H557A>、FLAG-PIPP以及FLAG vector重组质粒转染到小鼠受精卵,用蛋白印记、免疫荧光染色以及活性检测方法分析FLAG-PIPP<'H557A>对小鼠受精卵中丝氨酸(Ser)473位点磷酸化的苏氨酸蛋白激酶(pAkt Ser473)表达、定位以及活性的影响.结果:FLAG-PIPP<'H557A>在小鼠受精卵中对pAkt Ser473的表达和活性的调节作用明显低于FLAGPIPP的作用,两者间有显著差异(p<0.001);而且在小鼠受精卵中FLAG-PIPPH557A不能调节pAktSer473在细胞膜的定位.结论:PIPP<'H557A>在小鼠1-细胞期受精卵中可以通过改变PIPP的活性,影响pAkt Ser473的表达、定位以及活性.