豚鼠早期实验性近视眼巩膜成纤维细胞前部及后极部MMP-2mRNA及蛋白表达变化的研究

摘要

目的 研究豚鼠早期实验性近视眼巩膜成纤维细胞(guineapig scleral fibroblast,GSF)前部及后极部基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)的改变,探索近视的发病机制.方法 2周龄豚鼠30只作为实验组,另外再随机选取5只(10眼)正常2周龄豚鼠不作任何干预,作为正常对照眼.选取任意眼戴- 10.00 DS凹透镜,分别饲养6d、15 d、30 d后除去镜片,验光及测眼轴长度确定近视形成后,采用组织块培养法培养豚鼠的前部及后极部GSF,利用免疫细胞化学、实时荧光定量PCR、Western blot蛋白印迹法检测前部及后极部GSF中MMP-2表达变化.结果 MMP-2的表达定位于细胞浆和细胞核.实验组中前部GSF饲养15 d阳性表达率较高,30 d阳性表达率最高；后极部GSF饲养6d表达率开始较高,至15 d阳性表达率最高,以后保持较高的阳性表达率,各诱导时间点之间两两比较,差异均有统计学意义(均为P＜0.05)；自身对照组各组自身前部及后极部比较,差异均无统计学意义(均为P＞0.05).结论 体外培养的豚鼠GSF稳定表达MMP-2 mRNA及其蛋白,且前部GSF于诱导15 d开始阳性表达率较高,后极部GSF于诱导6d开始阳性表达率较高,后极部GSF较前部表达明显增多.