培养人视网膜色素上皮细胞机械损伤后工IL-8的表达

摘要

目的 探讨视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞受机械损伤后IL-8表达情况.方法 取在6孔培养板內培养的RPE细胞,并建立机械损伤模型.待细胞铺满融合后,每孔刮除相同面积的细胞,72 h后收集培养上清液,采用ELISA试验检测培养上清液中IL-8的表达,同时用免疫组织化学方法险测RPE细胞內IL-8的表达.结果 RPE细胞在基础状态下,免疫组织化学法检测细胞內IL-8的表达,几乎不着色.经过机械(损伤刺激充分反应后,在损伤边缘的RPE细胞內IL-8蛋白质的表达呈阳性,胞浆出现浓淡不一的棕黄色着色.ELISA检测结果显示,体外培养RPE细胞在基础状态下可表达少量的IL-8.在经过机械损伤反应后,IL-8表达量显著增加,3次检测中对照和刮伤模型上清液中IL-8的浓度分别是105 x 10-12kg·L-1、965×10-12kg·L-1,108×10-12kg·L-1、990 x 10-12kg·L-1,100x10-12kg·L-1、960X10-12kgL-1,两者间有显著差异(P<0.01).结论 体外培养RPE细胞经过机械损伤反应后,IL-8的分泌和表达显著增加.提示在视网膜脱离前及脱离过程中,RPX细胞受到通过视网膜神经上皮层传导过来的机械牵拉力的作用后在损伤的修复过程中,可能会诱导IL-8的产生,从而有助于启动RPE细胞的移行及早期的炎症反应,导致PVR的发生.