活血化瘀方剂对急性高眼压大鼠视网膜HIF-1α表达的影响

摘要

目的 观察活血化瘀方剂对大鼠视网膜急性高眼压损伤的保护作用及对低氧诱导因子-1 α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1 α)表达的影响.方法 140只清洁级Wistar大鼠随机分为对照组10只、穿刺组10只、加压组60只和治疗组60只.前房灌注加压法制作急性高眼压模型维持60 min(眼压至66 mmHg,1 kPa=7.5 mmHg).加压组分别于造模后2h、12 h、1d、3d、7d、14 d处死动物,治疗组在造模后即刻给予活血化瘀方剂4 mL灌胃,并分别在造模后2h、12 h、1 d、3 d、7 d、14 d处死动物.通过HE染色观察视网膜的形态学变化,免疫组织化学方法和实时定量逆转录聚合酶链反应(Real-Time qRT-PCR)方法检测HIF-1 α在各组视网膜中的表达情况.结果 造模加压后1d,光学显微镜下可见视网膜高度水肿,7 d时水肿基本消失,14 d时视网膜各层结构紊乱,明显萎缩变薄.治疗组造模加压后2 h、12 h视网膜形态学变化与加压组同一时间点无明显差别,其他各时间点视网膜损伤程度均较加压组同一时间点轻.免疫组织化学染色及Real-Time qRT-PCR结果显示:造模加压后2 h HIF-1α的表达即增加(IOD 0.54±0.06,mRNA 1.516 2±0.1199),12h达到高峰 (IOD 1.73±0.10,mRNA 2.904 1±0.1690),随着时间推移表达逐渐减少,14 d时降至最低(IOD 0.52±0.03,mRNA 1.2847±0.0434),但仍高于对照组(IOD 0.25±0.04,mRNA 1.000 9±0.048 0,P＜0.05);治疗组该因子的表达变化趋势与加压组相同,但除造模后2h、12 h外,治疗组各时间点HIF-1α 的表达量均比加压组同一时间点低,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 活血化瘀方剂对急性高眼压造成的视网膜损伤有保护作用,这种保护作用可能与其减少视网膜内源性HIF-1α的表达有关.