超声微泡介导Ngb基因过表达对大鼠视网膜急性高眼压损伤的保护研究

摘要

目的 探讨超声微泡靶向破坏(ultrasound-targeted microbubble destruction,UTMD)技术介导的脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)过表达对大鼠急性高眼压损伤的视网膜保护作用.方法 40只SD大鼠右眼进行基因转染,即利用UTMD将携带外源性Ngb基因的重组质粒转染至大鼠视网膜组织;左眼为对照组(未转染组),即只升高眼压.在转染后48 h,采用前房加压灌注升高眼压的方法制作急性高眼压模型,术后5 min、10min、30 min、60 min分别处死各组大鼠,摘取眼球,分离视网膜.Westernblotting检测Ngb在急性高眼压时表达的变化情况,测定并比较双眼的caspase-3活性.结果 UTMD介导外源性Ngb在视网膜各层均有表达,对视网膜没有造成损伤.未转染组Ngb表达水平呈时相性变化,在高眼压缺氧5～ 10 min时明显增高,在10min时达到峰值,随后开始下降,在60 min时最低.转染组Ngb表达水平明显高于未转染组,在缺氧30 min时达到峰值,随后开始下降.随着高眼压时间的延长,caspase-3活性逐渐增加,说明死亡的视网膜神经纤维层细胞越来越多.转染组的caspase-3活性明显低于未转染组,在相同时间点,两组之间差异均有统计学意义(均为P ＜0.05).结论 UTMD能够在体内安全、有效地介导Ngb基因转染至视网膜组织中.Ngb过表达可以降低视网膜对缺血缺氧的敏感性,起到视网膜组织保护作用.