马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B基因原核表达产物单抗的制备

摘要

用大肠杆菌BL21表达了马立克氏病病毒(MDV)强毒GA株的囊膜糖蛋白B(gB)基因,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离表达蛋白条带,切下并碾碎后作为免疫原制备单克隆抗体.通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光试验(IFA),得到1株GA株阳性的单克隆抗体杂交瘤细胞株7C8.该单抗腹水的ELISA效价为1:212,IFA效价为1:800,与MDV不同致病型毒株CVI988、GA、RB1B、MD11、648A株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)均呈IFA阳性.1:100稀释时与GA感染的CEF在斑点酶联免疫吸附试验(dot-ELISA)中呈阳性.