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hIL-18基因真核表达载体的构建及序列分析

         

摘要

在获得人白细胞介素18(hIL-18)基因重组质粒pGEM-T-hIL-18的基础上,用EcoRⅠ、SalⅠ双酶切该质粒,回收小片段hIL-18基因;同时双酶切真核表达质粒pECFP-C1,回收大片段,二者连接转化大肠埃希菌感受态细胞.对重组质粒pECFP-C1-hIL-18进行PCR扩增、酶切鉴定及序列测定,测序结果表明,克隆至pGEM-T中的IL-18 cDNA包含成熟IL-18的全部编码序列.本研究获得了融合有报告基因pECFP-C1的真核表达载体,为下一步进行hIL-18在真核细胞中的表达打下了良好的基础,亦为在基因水平上探讨hIL-18的生物学功能提供了物质基础.

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