青霉素酶特异性抗血清间接ELISA方法的建立

摘要

以青霉素酶为抗原,免疫健康獭兔,自行制备青霉素酶特异性抗血清(PcAb),并建立间接酶联免疫吸附试验(ELISA)的测定方法,优化试验条件,测定制备的青霉素酶特异性抗血清效价.结果表面抗原最佳包被浓度为10 μg/mL,酶标二抗最佳稀释度为1∶2 000,阳性血清最佳稀释度为1∶2 000,抗原最佳包被条件为4 ℃过夜,血清最佳反应时间为37 ℃ 1 h,酶标二抗反应最佳时间为37 ℃ 1 h,与底物作用的最佳时间为20 min.