抗血清
抗血清的相关文献在1976年到2022年内共计877篇,主要集中在畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂、基础医学、植物保护
等领域,其中期刊论文720篇、会议论文32篇、专利文献7202篇;相关期刊374种,包括生物技术通报、中国病毒学、中华微生物学和免疫学杂志等;
相关会议29种,包括中国植物病理学会2014年学术年会、第五届中国畜牧科技论坛、世界中联中药药剂专业委员会第五届学术年会暨中华中医药学会制剂分会2010年学术年会等;抗血清的相关文献由2679位作者贡献,包括徐志伟、袁金城、李大伟等。
抗血清
-研究学者
- 徐志伟
- 袁金城
- 李大伟
- 李辉
- 于嘉林
- 何洪彬
- 张富春
- 李向东
- 韩成贵
- E.德安格里斯
- O.舍恩
- 刘海群
- 李怀方
- 王启贵
- 王洪梅
- C.埃尼弗
- 刘志昕
- 刘忠贵
- 吴云锋
- 张建新
- 曾华金
- 李庆章
- 杨冬
- 王宇祥
- 王立群
- 王颖
- 石慧
- 刘胜旺
- 吴笛
- 孙远明
- 屈凌波
- 张宗英
- 张永亮
- 王成新
- 王献兵
- 罗靖雄
- 刘晓
- 刘起丽
- 吴信海
- 吴振兴
- 吴祖建
- 孙敏
- 崔红娟
- 张仲凯
- 张传明
- 张振臣
- 房保海
- 方琦
- 朱来华
- 李洪波
-
-
柴生樾;
王浩;
王西平
-
-
摘要:
SBP-box基因在植物响应逆境胁迫中起着非常重要的作用,通过制备华东葡萄(V.pseudoreticulata)转录因子VpSBP16基因抗血清,为深入探究葡萄抗逆相关基因VpSBP16的功能试验提供基础。将已构建的pGEX-VpSBP16原核表达载体转入大肠杆菌中,利用IPTG诱导表达的蛋白作为抗原注射新西兰兔,从而获得VpSBP16基因抗血清,利用Western blot检测手段,以所获得的VpSBP16基因抗血清作为一抗检测毛葡萄‘商-24’叶、茎、花序、卷须和果实不同发育时期的VpSBP16蛋白表达情况。结果表明,原核表达载体pGEX-VpSBP16在大肠杆菌菌株DE3中高效表达,Western blot检测出与预期结果一致的分子量约为87kD的GST-VpSBP16融合蛋白。在新西兰兔的背部及腹股沟注射纯化后的目的融合蛋白获得了免疫-抗原反应良的多克隆抗血清。提取葡萄总蛋白后检测到VpSBP16蛋白表达量在花序中含量最低,而在果实发育的绿果期表达量较高。大肠杆菌表达系统中,pGEX-VpSBP16融合蛋白可以在27°C、0.6 mmol/L IPTG诱导条件下获得高表达。因此,笔者研究制备的多克隆抗血清具备效价高、特异性强的特点。VpSBP16基因不仅增强植物非生物胁迫的抗性,也可能会影响葡萄花发育和葡萄果实成熟,参与调节葡萄从营养生长到生殖生长的转变。
-
-
徐小伟;
陈雯;
丁诗文;
甘海锋;
张坤;
贺振
-
-
摘要:
甘蔗线条花叶病毒Sugarcane streak mosaic virus(SCSMV)是引起甘蔗花叶病的主要病原之一,在世界各大蔗区普遍发生,严重威胁甘蔗产业的发展。建立快速有效的检测方法对于SCSMV的防控有着重要意义。本研究依据SCSMV P 1基因序列合成一对引物,扩增获得1074 bp的目的基因,将目的基因与原核表达载体pET28a连接,获得pET28a-P1^(SCSMV)。将连接正确的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta菌株,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳检测显示在分子量约为42 kDa处有目的蛋白带,与预期的SCSMV P1大小一致。融合蛋白主要是以可溶性蛋白的形式存在。利用镍柱亲和纯化重组的SCSMV P1蛋白,并免疫健康新西兰大白兔,制备兔抗血清。Western blot分析显示,在对多个样品进行检测时制备的抗血清能特异性地识别SCSMV的P1蛋白,在受SCSMV侵染的甘蔗植株中能检测到P1蛋白的表达,而在健康植株中检测不到P1蛋白的表达。制备的抗血清稀释至1∶20000时仍能特异地检测到目的蛋白条带,说明通过大肠杆菌表达P1制备的SCSMV抗血清特异性强,效价高。本研究为SCSMV的快速检测提供了有效方法。
-
-
李晨;
张婷;
王志荣;
许雪梅
-
-
摘要:
目的制备肠道病毒71型(EV71)外壳蛋白表位肽多克隆抗血清。方法利用5种B细胞表位预测软件对EV71外壳蛋白进行分析,设计针对病毒蛋白(VP)的4种表位肽,即VP1(aa.204-223)、VP2(aa.133-163)、VP3(aa.139-148+aa.173-191)和VP4(aa.1-23),化学合成后与钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)偶联得到相应肽。然后,分别联合MF59/CpGC274佐剂皮下免疫BALB/c小鼠6次,间隔2周,采集血清,用ELISA和Western blot对其抗体活性进行分析。结果4种抗血清均可有效结合EV71病毒和其变性病毒,VP2抗血清与变性病毒的结合活性较高,其余3种与病毒及变性病毒的结合力相当;而且4种抗血清均可与病毒样颗粒(VLP)及变性VLP结合。VP1和VP2抗血清分别与EV71 VLP中的组成蛋白VP1和VP0(VP2和VP4前体蛋白)结合,其中VP2抗血清的结合活性最好,VP1抗血清次之;同时,VP1和VP2抗血清还可与EV71病毒特异性高效结合,且VP2抗血清可同时结合EV71病毒的空心颗粒的VP0及实心颗粒的VP2。VP3和VP4抗血清与VLP和病毒未显示明显的结合活性。结论成功制备了4种EV71表位肽多克隆抗血清,为ELISA和Western blot提供检测工具,并可用于EV71疫苗质控(QC)研究。
-
-
秦阳阳;
陈香玲;
王甲军;
叶肖;
申世凯;
周彦
-
-
摘要:
【目的】柑橘褪绿矮缩病毒(Citrus chlorotic dwarf-associated virus,CCDaV)是一种新的柑橘病毒,为给我国柑橘脱毒苗木质量控制和田间监测提供技术支撑,建立了一种灵敏度高、特异性强的快速检测方法。【方法】通过序列分析和相似性比对,明确抗原靶标;构建CCDaV-CP的原核表达载体,诱导目的蛋白表达后作为抗原用于注射兔子,制备抗血清。运用Western blot检测效价。通过优化抗体浓度,建立CCDaV的dot-ELISA检测方法,明确其灵敏度,并用于田间疑似样品检测。【结果】以外壳蛋白(CP)的保守区域为靶标,成功构建了表达载体pET28a-CCDaV-CP,其在18°C,IPTG浓度0.5 mmol·L^(-1)时,诱导12 h,目的蛋白的表达量高。制备的特异性抗血清效价为1:3000。由此建立的dotELISA检测方法在提取液被稀释640倍时,仍能检测出CCDaV。应用该方法对42份田间疑似样品的检测结果与PCR法的符合率为94.73%。【结论】首次获得了CCDaV的抗血清,并以此建立了快捷、灵敏、准确的dot-ELISA检测方法,为CCDaV的快速检测和防控提供了技术支撑。
-
-
王丽君;
王凤鑫;
王晗
-
-
摘要:
制备了刺参免疫相关因子AIF-1抗血清并检测AIF-1蛋白水平的表达。提取刺参呼吸树组织总RNA,利用RT-PCR技术扩增AIF-1基因编码区,大小与预期相符。PCR产物测序结果与Genebank报道序列一致。基因序列经密码子优化,体外合成并构建重组表达载体pET-29b(+)-AIF-1-his,成功诱导了可溶性重组AIF-1蛋白的表达。镍离子金属螯和层析纯化重组AIF-1蛋白,纯化产物可见单一条带。以纯化的重组AIF-1蛋白注射小鼠进行免疫,制备鼠抗AIF-1多抗血清,间接ELISA法检测抗血清效价为1∶102400。荧光定量PCR和蛋白免疫印迹分析结果检测到刺参内源性AIF-1蛋白的表达。灿烂弧菌体腔注射AIF-1后,刺参呼吸树和AIF-1的转录和蛋白水平表达均显著增加。
-
-
李雪;
李旭欣;
GiRi B R;
刘静宜;
刘军涛;
夏天奇;
杜鹏飞;
李慧民;
李舜;
程国锋
-
-
摘要:
血吸虫病是由血吸虫尾蚴感染引起的一种人畜共患寄生虫病,对宿主造成严重病理性损害,是WHO确定的六大重点热带病之一。血吸虫体被直接与宿主的免疫系统相接触,是宿主与虫体信息交流的重要界面,位于虫体体被跨膜蛋白的功能研究尤显重要。本文对日本血吸虫膜蛋白(TEME66P)的cDNA进行表达和抗血清的制备。首先,利用生物信息学分析TMEM66P跨膜结构,并构建系统进化树,构建重组原核表达质粒并表达纯化重组蛋白,制备抗血清,通过Western blot对抗血清的特异性进行检测。研究表明TMEM66P存在跨膜区,其氨基酸序列与曼氏血吸虫同源性为67.79%,抗血清能够识别出全虫蛋白中TMEM66P,具有良好的特异性。本研究为进一步探索TMEM66P在日本血吸虫中的功能奠定了初步基础。
-
-
王凌琪;
董婷婷;
陈雯;
甘海锋;
徐小伟;
秦朗;
李良俊;
贺振
-
-
摘要:
根据已报道的甘薯潜隐病毒莲藕分离物sweet potato latent virus-lotus(SPLV-lotus)核苷酸序列设计引物,采用RT-PCR从感病莲藕样品中扩增获得SPLV-lotus辅助成分-蛋白酶基因(HC-Pro),大小为1375 bp。通过序列测定和分析后,将其克隆到原核表达载体pGEX4T-1,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导并纯化获得大小为74 kD的融合蛋白pGEX4T-1-HC-Pro^(SPLV-lotus)。SDS-PAGE结果显示,融合蛋白获得过量表达。以纯化蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备抗血清,采用ELISA和Western blot对抗血清效价和特异性进行检测,当HC-Pro抗血清稀释比为1∶256000时,ELISA显色后OD_(450)读数仍高于0.6,表明所制备抗血清合格;Western blot结果显示,在感染SPLV-lotus植株样品中仍能检测到单一目的条带。这些结果表明,制备的抗血清效价合格且可用于SPLV-lotus的特异性检测。
-
-
宋若楠;
饶雪琴
-
-
摘要:
建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)是危害兰花的重要病毒.为对建兰花叶病毒广东分离物运动蛋白TGBp1进行研究,本试验制备了TGBp1多克隆抗血清,将CymMV广东分离物TGBp1基因克隆到原核表达载体中,诱导表达融合蛋白,以其为抗原制备多克隆抗血清,并对TGBp1进行生物信息学分析.结果表明,TGBp1融合蛋白的相对分子质量约为31.5 kD,该融合蛋白以包涵体形式存在;并以纯化的融合蛋白为抗原成功制备了TGBp1多克隆抗血清.Western blot分析表明,该抗血清与融合蛋白有较强的免疫反应;间接ELISA结果显示其效价高达524288倍.生物信息学分析表明,该蛋白结构特征与已报道的CymMV其他分离物基本一致.本研究所制备的TGBp1多克隆抗血清具有专化性,为该蛋白质的生物学功能研究奠定了基础.
-
-
蒋钦群
-
-
摘要:
养殖效益的提升,要求养殖人员以饲料配置、品种选择和科学管理为切入点,减少疾病,提高出栏率.为此,建议养殖户在坚持预防为主,治疗为辅方针的基础上,采取有效的免疫措施.本文会对疫苗保存、防疫技术、防疫环境展开深入的分析,并总结动物防疫的经验,希望为相关行业提供借鉴.
-
-
苏桂民;
杜琳;
纪国存;
龙静;
郭通;
冀颖;
陈浩;
杜光远;
肖启东;
朱卫华
-
-
摘要:
目的 通过检测血清抗体滴度和杀菌抗体检测(SBA)评价重组H因子结合蛋白(fac-tor H binding protein,fHBP)的免疫原性.方法 选择并合成fHBP序列,连接至pET43.1a质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),表达两个亚家族的重组fHBP蛋白,fHBPA和fHBPB,经过纯化后免疫家兔和小鼠,通过ELISA和SBA试验检测免疫抗血清效价和B群脑膜炎球菌流行菌株的杀菌滴度.结果fHBP免疫兔血清效价均大于2.0×106,免疫小鼠血清效价高于1.0×106.69株流行株SBA试验中fHBP免疫兔血清对41株A亚家族和20株B亚家族均有大于1 ∶ 128杀菌滴度,亚家族靶菌之间没有交叉保护作用.fHBPA小鼠血清对A亚家族流行株Nm210902、Nm211009、Nm450522平均滴度为1∶1 024、1 ∶ 608、1∶ 861,对 Nm510703、Nm311304、Nm431002流行株的滴度为 1 ∶ 234、1 ∶ 861、1 ∶ 430;fHBPB小鼠血清对B亚家族流行株Nm311302、Nm311113和Nm321114的杀菌滴度分别是1 ∶ 2 896、1 ∶ 1 878和 1 ∶ 430.而 fHBPA 和 fHBPB 混合蛋白质免疫鼠血清 Nm210902、Nm510703和Nm311302平均滴度分别1 ∶ 876、1 ∶ 274、1 ∶ 1858,对3株靶菌均存在有效杀菌.结论 fHBP免疫抗血清效价均在1.0×106水平以上,对61株B群流行株的杀菌滴度大于1 ∶ 128,对69株B群脑膜炎球菌流行株有94.2%的保护效果.
-
-
Liang QD;
梁勤东;
Wang LC;
王路长;
Xia RJ;
夏汝杰;
Bao Y;
保勇
- 《四川省医学会第十六次检验医学学术会议》
| 2016年
-
摘要:
目的:构建7段CA153串联重复序列的原核表达载体,表达纯化重组蛋白,并制备其抗血清. 方法:全基因合成7段CA153分子的重复序列,将目的基因导入PET32a+原核表达质粒中,构建7段CA153串联重复序列原核表达载体(PET-CAI53);转化至BL21(DE3),摸索并确定最佳表达条件;采用Ni柱亲和层析,纯化重组蛋白;western blot鉴定重组蛋白后,免疫新西兰大白兔,纯化制得其抗血清. 结果:成功构建7段CA153串联重复序列原核表达质粒(PET-CA153);经SDS-PAGE电泳结果最终确定重组CA153在15°C,6h,IPTG0.5mmol/L的条件下得到高效可溶性表达;SDS-PAGE及western blot结果显示经Ni-NTA亲和系统纯化,得到了纯度较高重组CA153蛋白,将纯化的蛋白免疫新西兰大白兔后制得纯度和特异性较高多克隆抗体. 结论:成功建立高效的重组CA153原核表达系统,纯化并制得其抗血清.
-
-
-
-
-
-
郑颖;
张志晓;
杨彦;
邵敏珍;
叶锋平;
范泉水
- 《全国医药生物技术2010年学术研讨会暨全军第十届生物技术学术研讨会》
| 2010年
-
摘要:
世界卫生组织网站最新公布的数字显示,全世界约有3000多种蛇,其中600余种为毒蛇;rn 每年被蛇咬伤的人数有250万,导致死亡的人数高达12.5万.我国现有蛇类200多种,其中有毒蛇50余种.银环蛇是我国常见的毒蛇,属于眼镜蛇科眼镜蛇亚科环蛇属,其毒液主要含神经毒.部队野外作战作训常会遇到毒蛇袭击.传统的治疗毒蛇咬伤的方法是外敷、口服中草药和注射用全毒免疫马得到的抗蛇毒血清,但这些方法皆有一定的缺点.rn 因此,我们探索一种新的、可克服传统抗血清的缺点,且可方便制备多价抗血清的方法.
-
-
-
- 《中国植物病理学会2008年学术年会》
| 2008年
-
摘要:
用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其克隆到原核表达载体pET29(a)上,得到p(E)T29a-PPV重组载体,将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3)后,IPTG诱导表达产物经过SDS-PAGE分析,结果表明PPV CP基因在大肠杆菌中得到了高效表达.分别用亲和柱法和切胶法回收特异性表达蛋白,再免疫家兔,获得PPV特异性抗血清,经过酶联免疫吸附法测定,其效价分别为3.2×104和4×103,且具有较高的特异性。
-
-
沈俊俊;
许健;
黄秀芬;
李永清
- 《中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会》
| 2016年
-
摘要:
鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)是引起鸡新城疫的病原体.为研究鸡基因Ⅶ新城疫病毒融合蛋白F,本研究通过PCR方法扩增出鸡新城疫Ⅶ的F基因,并采用生物信息学软件对其进行分析,将分析后的F基因的两种基因片段分别连接到pET32-a(+)表达载体上,经转化到大肠杆菌DL21中诱导表达,并对蛋白的表达、可溶性进行鉴定、同时采对纯化后的F蛋白兔疫BALB/C小鼠制备抗血清,采用兔疫印迹方法鉴定抗血清与F蛋白及病毒的反应原性.研究结果为去除了信号肽的F基因片段分别为762bp及1347bp,将其进行表达后蛋白大小分别约为48kDa及68kDa,均为包涵体表达,该蛋白免疫小鼠制备的抗血清可以与F蛋白及NDV病毒反应.结果表明,本研究成功表达了NDVⅦ的F基因并制备了抗血清,研究结果将为新城疫病毒F蛋白的应用及基础研究提供理论参考.
-