1型鸭疫里氏杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立

摘要

以1型鸭疫里氏杆菌(RA)全基因组保守区域ompA基因的重组表达产物为包被抗原,建立了检测RA血清抗体的间接ELISA方法.原核表达的重组ompA蛋白经纯化后作为包被物,以方阵滴定法确定抗原最佳包被浓度为1.5 μg/mL,待检血清最佳稀释度为1:100.与普通的微量凝集试验相比较,该方法灵敏度高于凝集试验约16倍～128倍.与鸭源大肠埃希菌、鸭源多杀性巴氏杆菌、鸭链球菌、鸭源呼肠病毒、鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒感染鸭血清均无交叉反应,表明该方法特异性好.利用该方法检测了雏鸭免疫RA灭活油乳剂疫苗之后血清抗体水平.