鸭坦布苏病毒E蛋白主要抗原区域的原核表达与鉴定

摘要

根据GenBank中发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)基因序列,设计合成一对特异性引物,RT-PCR扩增966 bp E基因片段并克隆至pMD18-T载体中,经鉴定正确后,将其定向克隆至pET30a表达载体中,经鉴定正确后,重组阳性质粒转化大肠埃希菌BL21 (DE3)表达菌,经IPTG诱导获得了以包涵体形式表达的重组蛋白.采用镍离子亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,Western blot检测证明该重组蛋白可与抗血清发生反应.