MicroRNA-21靶向调控β-catenin促进骨肉瘤细胞U2OS的增殖与侵袭

摘要

目的:研究微小RNA-21 (microRNA-21,miR-21)对骨肉瘤细胞U2OS增殖与侵袭的影响及其可能机制.方法:采用Real-time PCR (RT-PCR)检测miR-21在骨肉瘤和临近正常骨组织中的表达差异.通过脂质体转染法将miR-21模拟物(microRNA-21 mimics,即mimics组)及microRNA无关序列(microRNA-NC,即NC组)转染入骨肉瘤细胞U2OS,real-time PCR(RT-PCR)检测miR-21和β-catenin mRNA在U2OS细胞中的表达,Western blot检测β-catenin蛋白在U2OS细胞中的表达,并通过双荧光素酶报告基因验证miR-21与β-catenin基因3'-非编码区(3'-untranslated region,3'-UTR)的特异性结合作用.MTT法检测U2OS细胞体外增殖能力;Transwell侵袭模型探查U2OS细胞侵袭潜能.结果:骨肉瘤组织中miR-21水平显著高于正常骨组织(P＜0.05).过表达miR-21能够增强细胞增殖与侵袭,上调U2OS细胞β-catenin mRNA和蛋白的表达.双荧光素酶报告基因结果表明miR-21可与β-catenin基因3'-UTR结合,从而对β-catenin的表达起调控作用.结论:miR-21可能通过调节β-catenin的表达促进骨肉瘤细胞U2OS的增殖与侵袭.