靶向性甲基化酶真核表达载体pcDNA3.1-myc-3a的构建

摘要

目的:在pcDNA3.1真核表达栽体中构建表达融合myc-6his标签的靶向性甲基化酶pcDNA3.1-myc-3a并进行鉴定.方法:以含有myc全长基因的pcDNA3.1-myc-Luc质粒为模板,通过PCR方法扩增获得myc(DBD),再以含有靶向性甲基化酶的pcDNA4.0-GBD-3a-myc-6his质粒为模板,通过PCR的方法扩增获得融合有myc-6his标签序列的目的区段3a,然后将两者克隆入表达栽体pcDNA3.1;以双酶切和PCR方法对构建的载体进行鉴定.结果:通过PCR方法获得了靶向性甲基化载体pcDNA3.1-myc-3a,并通过免疫印记方法验证了抗myc标签抗体可以特异性识别目的蛋白.结论:正确构建了靶向性甲基化酶pcDNA3.1-myc-3a的真核表达载体.