磷离子对BM-hMSCs增殖及成骨分化的影响

摘要

目的:探讨磷离子对人骨髓来源的间充质干细胞(Human bone marrow mesenchymal stem cells,BM-hMSCs)增殖及成骨分化的影响.方法:从ScienCell实验室购买的BM-hMSCs分别在无血清生长培养基(对照组)和添加4mmol(4P组)、8mmol(8P组)磷离子的无血清生长培养基中培养21天,通过CCK8比色法评估细胞的增殖情况;RT-PCR检测成骨分化标记性基因胶原蛋白Ⅰ、骨钙素、碱性磷酸酶的表达水平;茜素红染色检测BM-hMSCs成骨分化产生的矿化结节.结果:在培养4、7、14天时,4P和8P组中BM-hMSCs的增殖都明显高于对照组,且8P组中BM-hMSCs的增殖高于4P组;培养21天时,4P和8P组中BM-hMSCs的增殖明显低于对照组.与对照组相比,在培养7天时,4P和8P组OC的表达下调,而14、21天时,OC的表达上调.4P和8P组中ALP的表达水平与对照组无明显差异.7天时,4P、8P组Col Ⅰ的表达水平均明显高与对照组;14天时,8P组Col Ⅰ的表达水平与对照组表达无明显差异;21天时,4P、8P组中Col Ⅰ的表达水平都均与对照组表达无明显差异.培养21天时,4P、8P组矿化结节的形成明显增加.结论:磷离子在早期可以促进BM-hMSCs的增殖,晚期诱导其成骨分化.