Notch-Hif-1α信号通路参与调控大鼠肝再生过程的研究

摘要

目的:探讨使用γ分泌酶抑制剂Fli-06特异性阻断Notch信号通路后,大鼠肝部分切除术后肝再生的情况并初步阐明Notch-Hif-1α信号通路调控肝再生的可能机制.方法:取SD大鼠分为对照(生理盐水注射组,n=24)和抑制剂组(γ分泌酶抑制剂注射组,n=24).给予药物处理后,两组分别施行大鼠肝部分切除术,术后0d,1d,3d,5d,每个时间点分别留取对照组(n=6)及抑制剂组(n=6)再生的肝组织,并检测相应肝重体重比,免疫组化法检测再生肝PCNA(增殖细胞核抗原,Proliferation Cell Nuclear Antigen)表达,RT-PCR检测再生肝组织中的Notch1、Hes1、VEGF mRNA的变化,Western-Blot法检测NICD(Notch胞内段,Notch Intracellular Domain)、Hif-1α(低氧诱导因子-1α,Hypoxia Inducible Factor-1α)蛋白在肝再生过程的变化情况.结果:1、肝部分切除术后3d和5d,抑制剂组肝重体重比明显低于对照组差异有统计学意义(P＜0.05);2、免疫组织化学染色结果提示:抑制剂组再生肝PCNA阳性细胞率在术后1d,3d,5d均明显低于对照组(P＜0.05);3、Western blot结果表明:NICD和Hif-1α蛋白水平明显低于对照组(P＜0.05);同时RT-PCR结果提示:抑制剂组Hes1的mRNA表达量术后1d,3d明显低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).同时,抑制剂组VEGF mRNA水平在术后3d,5d明显低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:在大鼠肝部分切除术后肝再生过程中,使用γ分泌酶抑制剂Fli-06抑制Notch信号通路后,大鼠的肝再生能力明显降低,Notch-Hif-1α信号通路可能参与调控了大鼠肝部分切除术后肝再生过程.