影响外源DNA导入哺乳动物细胞的相关因素研究

摘要

目的:建立适合本实验室的标准化转染方法.方法:采用磷酸钙-DNA共沉淀转化法将多组重组质粒导入HeLa细胞,观察其转化效率的相关影响因素.结果:待转化的细胞应为单层略稀疏的对数生长期细胞;重组质粒DNA的浓度为8 μg/100 mL～10 μg/100 mL培养瓶;转化时间为10 h;G418是在转化后24 h加入,浓度为200 μg/ mL.结论:重组质粒DNA导入哺乳动物细胞方法的标准化为外源基因在哺乳动物细胞中的高效表达创造有利条件.