浅析CRISPR/CAS系统诱导的哺乳动物细胞基因组突变及相关检测方法比较

摘要

目的：浅析CRISPR/CAS系统诱导的哺乳动物细胞基因组突变,并比较相关检测方法的效果.方法：使用Cas9系统,在人293T细胞的打靶载体构建基础上,对相关基因实行定点的敲除,并使用Surveyor检测法、AFLP检测法以及HRM检测法检测打靶效率.结果：CRISPR/CAS系统诱导的哺乳动物细胞基因组突变率为40%.另外,在三种检测方法中以HRM检测最佳,Surveyor检测次之,而AFLP检测最差.上述两两间具有统计学意义（P〈0.05）.结论：CRISPR/CAS系统具有显著打靶效果,且操作比较简单,同时该系统识别效率比较高.HRM具有很高的检测效率,是一种良好的突变检测方法.