野生大豆DREB基因cDNA的克隆与分析

摘要

以野生大豆Glycine soja叶片总RNA为模板,根据其他双子叶植物DREBP/AP2结构域的保守氨基酸序列设计简并引物,通过降落和巢式PCR进行扩增,获得1条190 bp的cDNA片段.以此序列设计引物,采用RACE扩增3'和5'末端未知序列,最终克隆到野生大豆DREB全长基因(GsDREB).该基因1 191 bp编码395个氨基酸,基因内部没有内含子.氨基酸分析表明,其N-末端具有核定位信号(nuclear localization signal, NLS),并具有由58个氨基酸编码的、能够与DNA结合的保守区域-DREBP/AP2结构域.通过多序列比对分析,该基因与拟南芥Arabidopsis thaliana DREB2C氨基酸序列相似性最高,推测其为DREB2亚家族的成员.