冬凌草甲素联合顺铂对宫颈癌SiHa细胞凋亡及FOXL2、Ki67表达的影响

摘要

目的 观察冬凌草甲素(ORI)联合顺铂(DDP)对宫颈癌细胞SiHa细胞凋亡的影响,并探究具体作用机制.方法 培养宫颈癌SiHa细胞,分别给予冬凌草甲素(4、8、16、32、64 μg/mL)、顺铂(1、2、4、8、16 μg/mL)单独作用12、24、36、48、60、72 h,采用偶氮唑蓝(MTT)法对细胞增殖情况进行检测,筛选合适作用浓度和作用时间.将宫颈癌SiHa细胞分为4组:对照组、冬凌草甲素组、顺铂组、冬凌草甲素联合顺铂组,药物作用48 h后,采用MTT法检测细胞增殖情况;采用流式AnnexinV-FITC/PI双标法检测细胞凋亡情况;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测FOXL2、Ki67 mRNA水平;采用免疫印记(WB)法检测FOXL2、Ki67蛋白水平.结果 选定冬凌草甲素32 μg/mL、顺铂4μg/mL进行用药;与对照组比较,冬凌草甲素、顺铂单独及联合用药均可明显降低SiHa细胞增殖指数(P＜0.05),且联合用药效果显著优于单独用药(P＜0.05);与对照组比较,冬凌草甲素、顺铂单独及联合用药均可显著促进细胞凋亡(P＜0.05),且联合用药效果显著优于单独用药(P＜0.05);与对照组比较,单独及联合用药组SiHa细胞FOXL2 mRNA和蛋白水平均明显升高,且联合用药组显著高于单独用药组(P＜0.05);与对照组比较,单独及联合用药组Ki67 mRNA和蛋白水平均显著下降,且联合用药组显著低于单独用药组(P＜0.05).结论 冬凌草甲素、顺铂联合用药可有效促进SiHa细胞凋亡,推测冬凌草甲素可能通过上调FOXL2表达,下调Ki67表达,协同促进顺铂对宫颈癌细胞的促凋亡作用.