百合转录因子MYB12的克隆与表达分析

摘要

以东方百合‘索邦’(Lilium oriental hybrid‘ Sorbonne’)为材料,克隆获得花青素苷生物合成通路中的关键转录因子LhsorMYB 12基因.序列分析结果显示,LhsorMYB 12最大开放阅读框长720 bp,编码239个氨基酸,具有2个典型的DNA结合结构域:该基因包括3个外显子和2个内含子.该基因的氨基酸序列与郁金香(Tulipa fosteriana W.Irving)中的MYB氨基酸序列相似性最高.系统进化分析结果表明,LhsorMYB12在MYB基因家族中与已报道的控制花青素苷合成的基因形成一簇.进一步采用染色体步移技术,获得了LhsorMYB12基因起始密码子上游2143 bp的启动子序列,顺式作用元件预测结果显示,该序列中除核心启动子元件(TATAbox)外,还包含有MYB蛋白的绑定位点、光反应元件以及参与昼夜节律等反应的相关元件.基因表达分析结果表明,LhsorMYB12仅在‘索邦’花丝、花柱和花被片中表达:且在花蕾发育过程中表达量逐渐增高,花蕾盛开时表达量最大,但内、外花被的表达起始阶段不同.黑暗处理可导致LhsorMYB12表达水平降低;光照条件下该基因的表达水平随处理时间的延长表现出先上升后下降再持续上升的趋势.研究结果提示LhsorMYB12的表达变化规律可能与其启动子中相应的顺式作用元件相关.