接枝赖氨酸D155树脂固定化腈水解酶及其性质

摘要

以赖氨酸（Lys）修饰阳离子交换树脂D155合成出赖氨酸修饰两性阳离子交换树脂（Lys-D155）,再以该树脂为载体,制备出固定化腈水解酶（I-Nit-D155）,最后以I-Nit-D155为催化剂水解R,S-扁桃腈研究制备固定化腈水解酶的优化条件、主要酶学性质并对水解产物进行表征。红外分析表明,经赖氨酸修饰的D155成功制备出固定化腈水解酶I-Nit-D155。制备I-Nit-D155的优化条件为：室温、p H 5.25、载体游离氨基/戊二醛/腈水解酶摩尔比1∶0.11∶2.12×10-4,I-Nit-D15活力为10~15 U/mg、偶联率43.2%、Km值23.11 mmol/L,重复使用15次后活力仍可保持50%以上;I-Nit-D15水解R,S-扁桃腈的产物的熔点、比旋光度等分别为133℃、-155.57°,与R-扁桃酸一致,经红外、1H-和13C-核磁共振波谱表征确证为R-扁桃酸。