水飞蓟宾调控STAT3信号通路对肝癌细胞增殖和侵袭的影响

摘要

目的 研究水飞蓟宾调控信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 采用0、50、100、200和400μmol/L的水飞蓟宾作用于肝癌细胞HepG2,噻唑蓝(MTT)检测细胞存活率,计算半数抑制浓度(IC50).采用200μmol/L的水飞蓟宾作用于肝癌细胞,Transwell小室检测侵袭细胞数目,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中STAT3、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平.根据处理方法不同,将肝癌细胞分为未处理组、药物作用组和激活剂组,其中未处理组不加入任何药物,药物作用组细胞培养液中加入200μmol/L的水飞蓟宾,激活剂组在药物作用组的基础上再加入8μmol/L的STAT3通路激活剂SD19.将3组细胞培养48 h后,MTT检测细胞存活率,Transwell小室检测侵袭细胞数目,Western blot检测细胞中STAT3、p-STAT3、MMP-9蛋白的表达水平.结果 50、100、200和400μmol/L的水飞蓟宾处理后,肝癌细胞的存活率逐渐下降,IC50为(198.64±25.61)μmol/L.采用200μmol/L的水飞蓟宾作用的肝癌细胞后,侵袭细胞数目为(96.35±13.24),明显少于0μmol/L的水飞蓟宾作用后的(192.58±13.64),差异有统计学意义(P﹤0.01).与0μmol/L的水飞蓟宾作用的肝癌细胞相比,200μmol/L的水飞蓟宾作用于肝癌细胞后,p-STAT3和MMP-9蛋白表达水平均明显下降,差异均有统计学意义(P﹤0.01).激活剂组的细胞存活率、侵袭细胞数目及p-STAT3和MMP-9蛋白表达水平均明显高于药物作用组,差异均有统计学意义(P﹤0.01).结论 水飞蓟宾可抑制肝癌细胞的增殖和侵袭,作用机制可能与STAT3信号通路有关.