下调TPX2表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究

摘要

目的 探讨下调Xklp2靶蛋白(TPX2)表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制.方法 以卵巢癌细胞SKO-V3转染TPX2 siRNA和siRNA control分别作为干扰组和阴性组,以不作转染的细胞作为对照组.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术和蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中TPX2 mRNA和TPX2蛋白的表达水平,MTT法检测细胞的增殖情况,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞的凋亡情况,Western blot检测细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、增殖细胞核抗原(PCNA)、信号转导与转录因子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)蛋白表达水平.结果 阴性组与对照组细胞中TPX2 mRNA和TPX2蛋白的表达水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).干扰组细胞中TPX2 mRNA和TPX2蛋白的表达水平、光密度(OD)值、克隆形成率均明显低于对照组(P＜0.01).干扰组细胞中Cleaved Caspase-3的水平明显高于对照组,而Bcl-2、PCNA、p-STAT3/STAT3水平均明显低于对照组(P＜0.01).阴性组与对照组细胞的OD值、克隆形成率、凋亡率和Bcl-2、Cleaved Caspase-3、PCNA、STAT3/p-STAT3蛋白水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 下调TPX2表达能够抑制卵巢癌细胞的增殖,诱导卵巢癌细胞的凋亡,降低细胞的克隆形成能力,下调细胞中Bcl-2、PCNA、p-STAT3/STAT3的表达水平,促进细胞中Caspase-3的活化.