梨PbChiⅡ基因的克隆及荧光定量表达分析

摘要

以鸭梨为试材,采用qRT-PCR技术克隆鸭梨果实几丁质酶基因PbChiⅡ,并对几丁质酶氨基酸序列进行聚类分析;同时采用荧光定量PCR的方法对鸭梨植株不同器官及水杨酸(salicylic acid,SA)和梨轮纹病菌(Botryosphaeria berengeriana de.Not.f.sp.piricola (Nose) Koganecawa et.Sokwwa)处理后几丁质酶基因的表达量进行了分析,以期为该基因的进一步研究与利用提供参考依据.结果表明:PbChiⅡ基因长度为969 bp,核苷酸序列及推导的氨基酸序列与沙梨的同源性均达到100％,该基因属于第Ⅱ类几丁质酶基因;PbChiⅡ在根和果实中表达量较大.在鸭梨果实中,SA和病原菌可诱导该基因表达,且表达量在48 h达到最高,初步推测PbChiⅡ可能参与SA介导的植物抗病防卫反应的信号通路及轮纹病菌引起的防卫反应.