小胶质细胞介导的T细胞应答在大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎中的致病作用

摘要

目的探讨大鼠维持中枢神经系统(CNS)炎症的小胶质细胞、T细胞亚群之间的相互效应关系,以期部分解释实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中中枢神经系统(CNS)持续存在病理损伤的原因。方法用鼠源性髓鞘碱性蛋白MBP68-86抗原肽制备Lewis大鼠EAE模型,透射电子显微镜观察脑组织超微结构,免疫荧光染色、Western blot、流式细胞术和RT-qPCR检测外周血、脾脏、脑组织中相关分子的表达。结果MBP68-86抗原肽成功制备出EAE模型。流式细胞及免疫荧光分析发现EAE模型组外周血CD4^(+)T(28.01%)、CD8^(+)T(12.81%)细胞的数量及脾脏中MHCⅡ的表达明显上调(P<0.05)。同时,在中枢神经系统中小胶质细胞的CD86^(+)CD206^(-)M1样巨噬细胞的数量明显多于CD86^(-)CD206^(+)M2样巨噬细胞。Western blot和RT-qPCR结果显示EAE模型组小胶质细胞及脑组织中MHCI、IL-10、TGF-β、CD32b,Granzyme B、Perforin、FASL分子表达明显上调(P<0.05)。结论大鼠EAE免疫应答过程中,CNS存在一个由CTL和Th2细胞共同参与的免疫应答环路,这可能是维持MS/EAE时间-空间多发性的主要机制。