厚朴过氧化物酶的纯化、性质及清除双酚A特性研究

摘要

厚朴为鄂西南道地药材,其药用部位主要为干皮和枝皮,在其漫长生长过程中产生的大量叶片不能实现经济价值;我们前期研究发现厚朴叶片具有较高过氧化物酶活性,而过氧化物酶在酚类物质生物降解途径中能够发挥重要作用.为充分开发厚朴叶的经济价值,进一步提高资源综合利用效率,我们对厚朴叶过氧化物酶进行了纯化并初步研究了其性质;在此基础上,进一步研究了厚朴叶过氧化物酶在降解环境污染物双酚A上的特性.结果显示,经过硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析,从厚朴叶中分离提纯过氧化物酶,纯化倍数为52.8倍,回收率为14％.该酶的比活力为184140 U/mg蛋白,最适pH为6.0,对H2O2的Km值为4.23mmol/L,对愈创木酚的Km值为57.86 mmol/L,最适温度为80℃,热稳定性较好,75℃以下不易失活.其活性受到硫酸亚铁明显抑制.厚朴叶POD对BPA具有良好清除能力,在pH 4 ～9,温度25～65℃,H2OJBPA浓度之比为0.8条件下,经过3h,4000 U/L POD对0.2 mmol/L BPA清除率可达95％以上,MLP在酚类物质生物降解途径中具有潜在的重大利用价值.