人胶质细胞源性神经营养因子基因工程细胞保护多巴胺能神经元的实验研究

摘要

目的构建一种可分泌人胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的基因工程细胞,并探讨其在基因治疗帕金森病中的可能作用.方法克隆含Kozak序列的人GDNF cDNA,并将其转染至人类神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞,用RT-PCR方法筛选阳性细胞克隆,将此工程细胞与大鼠原代多巴胺能神经元共培养,免疫组织化学检测多巴胺能神经元. 结果 (1) 基因工程细胞可防止多巴胺能神经元退变死亡,与对照组比较,最多增加了95.4%,P<0.01.(2)工程细胞可抵抗MPP+对多巴胺能神经元的毒性损伤作用,与对照组相比,细胞数目增加了9.5～10.8倍, P<0.01. 结论首次构建了可分泌人GDNF的工程细胞,其对多巴胺能神经元具有明显的营养保护作用,其在帕金森病的基因治疗中可能具有重要的应用价值.