雷公藤对类风湿关节炎病人软骨细胞一氧化氮合成、一氧化氮合酶活性及其mRNA表达的体外抑制作用

摘要

目的探讨雷公藤治疗类风湿关节炎(RA)的作用机制.方法将RA病人膝关节置换术后的离体软骨经酶消化,并分离出软骨细胞进行体外培养,用白细胞介素(IL)-1β刺激,同时加用不同浓度的雷公藤、地塞米松及消炎痛培养过夜,收集细胞培养上清,用Griess试剂测定NO含量.收集软骨细胞,利用L14C-精氨酸向L14C-瓜氨酸的转换,测定iNOS活性.提取细胞总RNA,采用Northernblot方法分析iNOS-mRNA的表达.结果不同浓度的雷公藤(2、4、8及16 mg/L)对关节软骨细胞NO的合成和iNOS活性均有抑制作用,对NO合成的抑制率分别为10.8%、25.48%、55.17%及80.45%,对iNOS活性的抑制率分别为12.29%、27.67%、59.04%及85.06%,而且抑制程度与药物剂量成正相关,相关系数r为0.976和0.974,雷公藤对iNOS-mRNA的表达也有相应的抑制作用.与之相比地塞米松有明显的抑制作用,但无剂量相关,而消炎痛只有微弱抑制作用.结论雷公藤对人关节软骨细胞NO合成的抑制是通过限制iNOS基因转录而完成,这种抑制作用正是雷公藤治疗RA的作用机制之一.