系统性红斑狼疮自体外周血干细胞移植T细胞克隆基因谱型变化

摘要

目的通过系统性红斑狼疮(SLE)自体外周血干细胞移植(APBSCT)前后T细胞受体β(TCRβ)CDR3基因表达谱型的变化,探讨SLE发病机理以及患者干细胞移植后T淋巴细胞克隆的免疫重建特征.方法应用RT-PCR扩增APBSCT的SLE患者外周血的TCRβ可变区(V)25个家族的基因序列,在长泳道测序胶上电泳,形成TCRβ CDR3基因表达谱型图.通过谱型图上电泳条带分析SLE移植前T细胞克隆增生的特征以及移植后T细胞克隆群的变化,做增生T细胞克隆的TCRβ基因序列分析,了解TCRβ基因与自身免疫病的相关性.结果正常TCRβV25个家族的基因序列电泳后分别出现呈高斯分布的10余条电泳条带,组成CDR3基因表达谱型图.8例SLE患者谱型图均出现异常, 4例TCRβ在βV13.1基因家族T细胞出现寡克隆增生,3例在βV8, βV9, βV15家族中出现寡克隆性增生.APBSCT后T细胞克隆分布趋于正常, CDR3恢复多态性,部分恢复到正常TCRβ基因分布.测序结果显示谱型图上单一条带过度浓集往往是单克隆或者寡克隆T细胞增殖;发现SLE一个异常T细胞克隆的TCR βV8 CDR3氨基酸序列与已报道强直性脊椎炎疾病相关克隆完全一致.结论 SLE患者出现T细胞寡克隆增生,增生的T细胞克隆可能与自身免疫病发病有关.APBSCT后免疫重建,抑制了致病的T细胞寡克隆,可能是移植后SLE治疗缓解的主要因素.