大鼠海马神经干细胞外向电压门控性钾通道的电生理特性

摘要

目的研究大鼠海马源神经干细胞（NSC）外向电压门控性钾通道（Kv）的电生理特性。方法利用无血清培养、单细胞克隆技术,体外培养 SD 大鼠海马组织源 NSC。以免疫细胞化学方法对 NSC 及其分化后的子代神经细胞进行鉴定。应用膜片钳技术全细胞模式记录不同外向 Kv 通道的电生理特性。结果体外培养 SD 大鼠海马组织源 NSC 表达巢蛋白（nestin）,在体外可诱导分化产生分别表达 Tuj和 GFAP 的细胞。全细胞膜片钳可记录到三种外向 Kv 通道:一种缓慢激活的、对四乙基胺（TEA）敏感的延迟整流钾电流(IDR);一种快速激活和失活、可被4-氨基吡啶（4-AP）阻断的外向瞬时钾电流（IA）,其在+20 mV 和+50 mV 的电流密度分别为11 pA/pF±3 pA/pF 和29 pA/pF±7pA/pF（标本数=11）;一种可被 iberiotoxin（IbIX）抑制的大电导钙激活钾通道（BKCa）,钳制电位+80mV 时,加入100 nM IbTX 前后的电流密度分别为56 pA/pF±4 pA/pF 和45 pA/pF±4 pA/pF（标本数=6,P＜0.05）。结论体外培养的未分化状态下 SD 大鼠海马源 NSC 至少含有IDR、IA 和 BKCa 三种外向 Kv 通道。