RhoC基因表达与前列腺癌细胞系侵袭行为相关性的体外研究

摘要

目的研究 RhoC 基因在不同转移潜能前列腺癌细胞系中的表达及其与前列腺癌侵袭行为的相关性。方法利用逆转录聚合酶链反应、Western 印记方法检测前列腺癌不转移亚系（PC-3M-284）和高转移亚系（PC-3M-1E8）细胞中 RhoC mRNA 和蛋白表达水平;构建 RhoC 基因真核表达载体转染前列腺癌不转移亚系 PC-3M-284;利用 Matrigel 胶穿膜侵袭实验检测转染后细胞的体外侵袭能力、划痕修复实验检测运动迁移能力、组织化学染色检测微丝骨架结构的变化、明胶酶谱分析基质金属蛋白酶（MMP）活性变化,并利用 Western 印记检测 Akt 信号传导通路磷酸化水平变化。结果RhoC 在两种不同转移能力前列腺癌细胞系中不同程度表达,在高转移亚系中高表达,不转移亚系中低表达,差异具有统计学意义（P＜0.01）。基因转染过表达 RhoC 后前列腺癌细胞的体外侵袭能力明显增强,正义转染组（125.21±10.43）与其相应空载体组（53.77±8.56）、反义组（46.22±8.12）和未转染对照组（57.68±7.25）相比,穿膜细胞数明显增多（P＜0.01）;运动迁移能力明显增强,正义转染组16 h 划痕修复率（62.38±2.36）明显高于转染空载体组（32.23±2.43）、反义组（29.47±1.86）和未转染对照组（31.88±2.67）（P＜0.01）;组织化学染色显示正义转染组细胞内肌动蛋白多聚体减少,微丝骨架杂乱、模糊;此外,RhoC 基因正义转染组细胞 MMP-2活性上调,p-Akt 水平升高。结论RhoC 基因过表达促进前列腺癌细胞的体外侵袭能力,并与前列腺癌细胞系转移潜能正相关,有望成为阻断前列腺癌转移的治疗新靶点。