程序性死亡受体1和T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3在乳腺癌肿瘤微环境中的表达、分布及其与临床病理特征的关系

摘要

目的探讨程序性死亡受体1（PD-1）、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3（TIM-3）在乳腺癌肿瘤微环境中的表达、分布特征, 并分析两者之间的相关性及其与临床病理特征的关系。方法收集嘉兴市第一医院乳腺病科2016年6月至2017年5月收治的30例浸润性乳腺癌确诊患者术后肿瘤组织标本及癌旁组织标本, 将标本沿中心分为两份, 一份经包埋、冷冻切片后, 采用免疫荧光组织染色法观察肿瘤组织中PD-1、TIM-3蛋白表达情况及分布特征, 另一部分标本经剪碎、消化后, 采用非连续密度梯度离心法提取肿瘤浸润性淋巴细胞（TILs）, 通过实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）测定TILs中PD-1、TIM-3的mRNA相对表达量, 同时通过Western blotting技术测定其蛋白表达量。分析PD-1、TIM-3的表达与乳腺癌临床病理参数的关系, 并对PD-1、TIM-3之间进行相关性分析。结果免疫荧光结果可见相对于癌旁组织, 肿瘤组织中观察到了较多的PD-1、TIM-3阳性细胞。qRT-PCR显示TILs中PD-1、TIM-3 mRNA表达量均显著高于癌旁组织淋巴细胞（3.09±0.38比1.26±0.23、3.42±0.31比1.57±0.29, t=4.16、4.37, 均P＆0.05）。蛋白水平上, 肿瘤组织淋巴细胞中PD-1、TIM-3的表达水平（0.66±0.08、0.80±0.11）均明显高于癌旁组织（0.10±0.01、0.26±0.02）（t=6.79、4.57, 均P＆0.05）。病理资料分析, 在肿瘤组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移方面, 患者肿瘤组织淋巴细胞PD-1、TIM-3 mRNA表达水平差异均有统计学意义（t=2.22～2.99, 均P＆0.05）。相关性分析显示, 肿瘤组织中PD-1、TIM-3的表达之间呈显著正相关（r=0.616, P＆0.01）。结论在乳腺癌肿瘤微环境中, PD-1、TIM-3介导的信号通路对于乳腺癌的发生发展中发挥着重要作用, 为乳腺癌的组合靶向治疗提供新的依据。