人细胞色素P450 2B6的异源表达及活性分析

摘要

目的 获得有活性的人CYP2B6重组酶,用于进一步药物代谢研究.方法 采用Bac-to-Bac杆状病毒介导的昆虫细胞表达系统进行人CYP2B6重组酶的表达,采用His抗体进行蛋白质印迹分析.安非他酮作为底物进行重组酶活性测定,高效液相色谱法测定其含量.结果 蛋白质印迹分析检测到带有His标签的CYP2B6重组酶的表达,重组酶对安非他酮的Km值为(138±42)μmol·L-1,Vmytx值为(676±21)pmol·min-1·mg-1蛋白.结论 杆状病毒表达系统能成功表达有活性的CYP2B6重组酶,可用来进一步研究在药物代谢中的作用.