FoxO3a及MAFbx在大鼠失神经腓肠肌细胞中的表达变化

摘要

目的 探讨失神经大鼠腓肠肌细胞中FoxO3a及MAFbx的表达规律.方法 72只Wistar大鼠随机分为12组,每组6只,切断大鼠右侧坐骨神经,左侧行假手术,分别于术后0、1、2、3、4、5、6、7、10、14、21、28d处死1组大鼠,取右侧腓肠肌,称重并与左侧腓肠肌对比后,保存于-70℃冰箱.分别使用实时荧光定量PCR法和Western Blot法对其中的FoxO3a和MAFbx的基因和蛋白及253位磷酸化的FoxO3a(pFoxO3aS253)进行检测.结果 失神经后骨骼肌迅速发生萎缩,失神经14d后肌湿重约下降50％,28d后肌湿重仅存正常时的30％.MAFbx的基因表达在失神经第4d达到峰值(39.1倍),其后逐渐下降至正常.FoxO3a的基因表达在失神经第5d达到峰值(7.06倍),而后缓慢下降,但仍高表达.FoxO3a和MAFbx的蛋白含量随失神经时间的延长逐渐升高,而FoxO3a和磷酸化水平逐渐下降,失神经28d时pFoxO3aS253的量只有失神经0d时的60.1％.结论 FoxO3a的磷酸化调节和MAFbx的表达改变与失神经骨骼肌萎缩关系密切,可以作为药物治疗和基因治疗的靶点之一.