基于纳米金和辣根过氧化物酶双标记抗体的黄曲霉毒素B1高灵敏检测方法的建立及应用

摘要

黄曲霉毒素B1 (aflatoxin B1,AFB1)在自然界普遍存在,可污染多种粮食作物和饲料,给动物和人类健康造成严重威胁.为建立AFB1高灵敏度的快速检测方法,本研究通过采用纳米金颗粒(Au nanoparticles,AuNPs)和辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)双标记AFB1单克隆抗体,建立新型酶联免疫检测方法(HRP-AuNPs IC-ELISA),检测下限(IC10)为0.017ng/mL,检测区间(IC20-IC80)为0.026-0.376ng/mL,半数抑制率(ICs0)为0.099ng/mL,与黄曲霉毒素B2、G1、G2和M1的交叉反应率分别为2.7％、9.3％、2.1％和5.3％,与赭曲霉毒素A、伏马毒素B1、桔青霉素、展青霉毒素和玉米赤霉烯酮几乎不存在交叉反应.在玉米和面粉样本中的加标回收率可达88.93-103.55％,与LC-MS/MS同时对天然样本中AFB1含量进行检测,结果表明,两种方法相关性良好.本研究建立的HRP-AuNPs IC-ELISA耗时短且灵敏度高,可用于实际样本中AFB1的快速定量检测与分析,也为其他霉菌毒素的精准检测技术开发提供参考.