实时RT-PCR定量检测前列腺癌患者外周血DD3mRNA及其临床意义

摘要

目的 探讨前列腺癌(PCA)患者外周血DD3 mRNA的检测方法及其临床意义.方法 建立SYBRCreen Ⅰ实时RT-PCR定量检测DD3mRNA,分别检测39例不同分期PCA患者(PCA组)、32例前列腺良性增生(BPH组)患者和26名健康男性(健康组)外周血中DD3 mRNA含量,并进行对比分析.结果 建立的SYBR Green实时RT-PCR方法最少可检测到10拷贝的核酸,在原始模板101～107拷贝范围内,CT值与起始模板浓度具有良好的线性关系;扩增后仅有的溶解曲线峰显示很好的特异性;批问变异系数范围为6.0%～14.8%.健康组DD3 mRNA均为阴性,27例BPH组患者中4例结果检测在101数量级,而39例PCA组中26例阳性.PCA组未治疗患者和去势治疗患者DD3 mRNA阳性率及定量值比较差异均有统计学意义(P<0.01),PCA组无骨转移患者和骨转移患者阳性率和定量值比较差异也均有统计学意义(P<0.05).结论 基于双链嵌合染料SYBR Green建立的RT-PCR定量检测DD3 mRNA方法具有敏感性高、线性检测范围广、特异性强及重复性较好的特点.外周血DD3 mRNA的丰度与前列腺癌的发生、发展及转归都有密切关系.