雷公藤甲素通过抑制Survivin的表达诱导人甲状腺乳头状癌细胞凋亡的机制研究

摘要

目的探讨雷公藤甲素(TPL)对人甲状腺乳头状癌(PTC)细胞凋亡的影响,并分析可能的作用机制。方法用不同浓度的TPL处理PTC K1细胞,用CCK-8分析PTC K1细胞的活性。通过流式细胞仪分析细胞凋亡和细胞周期。用空白对照组及用Survivin shRNA转染的PTC K1细胞,经TPL处理后,采用Western blotting检测Survivin、Caspase-3和Caspase-7的表达。结果经过5、10、25、100和500 nmol/L的TPL处理24 h后,PTC K1细胞的抑制率分别为11.00%、14.40%、32.70%、43.90%和61.70%。TPL具有对PTC K1的细胞毒性作用,且IC50值为170.9 nmol/L。Annexin V-FITC/PI双染色分析显示,经处理后的PTC K1细胞中凋亡细胞数量明显增加,细胞周期停滞在G2/M期。TPL通过剂量依赖性方式降低了Survivin表达,并由此激活了caspase-3和caspase-7表达,这一过程可被以Survivin为靶点的shRNA所加强。结论TPL通过抑制Survivin的表达,激活caspase-3和caspase-7依赖的凋亡途径,并引发G2/M期细胞周期停滞,有效地抑制了PTC K1细胞的活性及诱导细胞凋亡,其作用随剂量的增强而增强。