奥沙利铂诱导人舌鳞癌细胞株Tca8113凋亡及凋亡抑制基因Survivin表达的改变

摘要

目的：体外研究铂类抗癌药奥沙利铂(L-OHP)能否诱导人舌鳞癌细胞株Tca8113凋亡以及L-OHP作用过程中凋亡抑制基因survivin表达的改变。 方法：应用MTT法检测L-OHP不同浓度(16、32、64、128、256μmol/L)对Tca8113细胞增殖的影响，并确定中效浓度：光镜和电镜形态下观察中效浓度的L-OHP对细胞增殖的影响及凋亡形态，再用流式细胞仪观察细胞周期的改变，并定量测定凋亡率变化；分别应用免疫细胞化学方法和RT-PCR研究L-OHP作用于Tca8113细胞过程中凋亡抑制基因survivin表达变化。 结果：1.5种浓度的L-OHP均能够抑制Tca8113细胞的增殖，48～72小时达到高峰；2.倒置显微镜下Tca8113细胞形态发生了显著变化：泡化、扭曲、固缩、脱离贴壁生长；透射电镜下中效浓度的L-OHP作用Tca8113细胞72小时后出现了典型的细胞凋亡形态：细胞核固缩，染色质凝集及凋亡小体形成等；3.流式细胞仪观察L-OHP作用后Tca8113细胞周期阻滞于S期和G2/M期，48h、72h凋亡率变化有统计学意义(p<0.05)，且出现了典型的亚二倍体峰；4.L-OHP作用Tca8113细胞24、48及72小时免疫细胞化学方法可见survivin不同度增强表达；5.L-OHP作用Tca8113细胞24、48及72小时后RT-PCR法检测示survivinmRNA表达上调，除24h外，其余2个时相点加药组、对照组的上调有显著性差异(p<0.05)。 结论：1.L-OHP体外能诱导人舌鳞癌细胞株Tca8113发生凋亡；2.L-OHP体外作用人舌鳞癌细胞株Tca8113过程中，能使凋亡抑制基因survivin表达上调，可能是L-OHP化疗耐药性的机制之一。

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声明

摘要

前 言

第一部分：奥沙利铂诱导Tca8113细胞凋亡的体外研究

第二部分：体外奥沙利铂诱导舌癌细胞凋亡过程中survivin表达的变化及其与药物耐药的关系探讨

结 论

参考文献

综述

致谢