核转染仪辅助转染肝素酶基因siRNA有效性的实验研究

摘要

目的 研究核转染仪转染肝素酶基因siRNA的有效性.方法 采用核转染仪辅助转染技术和常规脂质体转染技术转染针对肝素酶基因启动子区和编码区设计siRNA,并通过实时定量RT-PCR,Western blot等技术检测2种转染技术转染后,肝癌细胞SMCC-7721在48h、72h和96h时肝素酶基因表达情况.结果 2种转染技术在转染后48h,从mRNA和蛋白水平上均能成功干扰掉肝素酶基因;但在转染后72h,脂质体转染组基因很快恢复表达,而核转染仪转染组基因仍保持沉默;在96h后,2组的肝素酶基因均恢复表达.结论 核转染仪可有效转染肝素酶基因siRNA,并使肝癌细胞SMCC-7721的肝素酶基因表达下调,且维持较长时间.