借助NucleofectorⅡ核转染仪实现EGFP基因高效转染西藏小型猪胚胎成纤维细胞

摘要

探索用NucleofectorⅡ核转染仪将外源基因导入西藏小型猪胚胎成纤维细胞(PEFs)的可行性.使用Lonza公司的NucleofectorⅡ核转染仪,参考已报道的转染其他猪种的PEFs效率最高的U020程序与相应的转染试剂,将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入西藏小型猪PEFs,并与脂质体转染的方法进行对比,观察转染效率.结果显示，转染5小时后,核转染仪组镜下即可见绿色荧光,转染效率高达80％,远远高于脂质体转染的方法.结论表明，用NucleofectorⅡ核转染仪能实现西藏小型猪PEFs的高效转染,按照本文所述的转染条件,转染效率可达80％.