利用丙氨酸突变探究PSMα4结构与功能的关系

摘要

目的 探究金黄色葡萄球菌酚可溶性调控蛋白α4(PSMα4)氨基酸残基发生突变后,对其细胞毒、趋化等功能的影响.方法 利用人工合成将多肽PSMα4中的非丙氨酸残基进行丙氨酸扫描定点突变,比色法测定溶血活性,LDH试剂盒测定细胞HCMEC/D3和PMN裂解程度,圆二色性(CD)检测以比较其结构上的改变,荧光标记法检测PMN的趋化强度,最后利用同源模拟初步预测了PSMα4的三维立体结构.结果与结论 PSMα4的I3、V4、I15、I17位氨基酸残基替换为丙氨酸后其细胞毒作用有所增强,结合CD的结果发现,细胞毒作用与其α螺旋程度呈正相关;PSMα4的第I7、I8、F18位氨基酸残基是影响其趋化作用的关键位点.