α2-巨球蛋白活性检测方法的建立与优化

摘要

目的 建立α2-巨球蛋白（α2-macroglobulin,α2-M）活性检测方法,检测Cohn组分Ⅳ中α2-M的活性。方法 α2-M可与胰蛋白酶相互作用形成＂α2-M-胰蛋白酶复合物＂,利用酶标仪检测出＂α2-M-胰蛋白酶复合物＂与小分子底物Na-苯甲酰-DL-精氨酸-对硝基酰胺盐酸盐（Na-benzoyl-DL-arginine 4-nitroanilide hydrochloride,BAPNA）显色反应后的光密度值（410 nm）,根据建立的血浆α2-M活性标准曲线,定量计算出Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2-M的活性。结果 通过对实验体系中几个关键实验条件进行优化,建立了血浆α2-M活性标准曲线,并计算出Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2-M活性的平均值为1.578 PU/ml。结论 以正常人混合血浆作为参考标准品,用发色底物法检测Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2-M的活性,方法简便易行,为α2-M制备过程中活性测定提供了实验基础。