胰蛋白酶抑制剂

摘要： 一、国内外大豆供需情况1.相关概况中国是大豆起源国,曾经被称为“大豆王国”,种植历史悠久。大豆是五谷(稻、黍、稷、麦、菽)之一,脂肪含量20%左右;蛋白质含量40%左右,是所有作物中蛋白质含量最高的。大豆具有多种抗癌成分,如皂苷、异黄酮、胰蛋白酶抑制剂、植酸、植物固醇等。大豆也是养殖业最主要原料之一,豆类蛋白是养殖业中养猪、鸡、牛、羊、鱼等的主要原料。中国消耗了全世界一半以上的猪肉和大量其他肉类制品。

摘要： 山黧豆(Lathyrus spp.)种质资源评价与筛选长期聚焦于获得低β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-L-α,β-diaminopropionicacid,β-ODAP)含量或低蛋白酶抑制剂活性的品种。为了研究β-ODAP含量与蛋白酶抑制剂活性之间的潜在关系,该研究利用SDS-PAGE、酶活检测和相关性分析等方法对家山黧豆(L.sativus)、扁荚山黧豆(L.cicera)等6个山黧豆品种的蛋白酶抑制剂活性、β-ODAP含量及二者之间的关系进行了分析。结果表明:(1)不同山黧豆品种的醇溶蛋白和可溶蛋白电泳图谱呈现出显著的差异。(2)不同山黧豆种子的胰蛋白酶抑制剂活性介于100~190 TIU之间,胰凝乳蛋白酶抑制剂活性介于5~9 CIU之间。(3)β-ODAP含量与丝氨酸乙酰基转移酶活性的皮尔逊相关系数可达0.76,呈显著正相关关系。(4)山黧豆转录组数据(SRP145030)中的β-ODAP生物合成关键基因与Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(Bowman-Birk inhibitor, BBi)基因表达水平呈显著负相关关系。该研究结果为进一步探讨分析山黧豆β-ODAP和BBi生物合成的调控与平衡,改善山黧豆的含硫氨基酸水平等奠定了基础。

摘要： 为优化大豆胰蛋白酶抑制剂的检测条件,以中黄13号大豆为原料,在GB 5009.224—2016的基础上,以吸光值为指标,进行单因素实验,探究L-BAPA用量,反应温度和反应时间对豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性检测的影响。通过正交试验得到最佳反应条件为:L-BAPA用量40mg,反应温度38°C,反应时间12min。此时吸光值为0.3952,符合标准要求。在此条件下测得自制生豆浆胰蛋白酶抑制剂活性为1.973mg/g。三个因素均对结果有显著影响,其顺序为:反应时间>L-BAPA用量>反应温度,其中反应时间具有极显著影响。该方法操作简洁,成本较低,重复性好,回收率高。该方法同样适用于市售豆制品的胰蛋白酶抑制剂活性检测。

摘要： 随着动物生产转向不使用抗生素,肠道健康至关重要。本文介绍了豆粕中的胰蛋白酶抑制剂会影响家禽肠道的内稳态和养分利用,从而对家禽的生产性能产生负面影响,在生产中应加以重视。

摘要： 为了丰富黑龙江地区的饲草资源,缓解高蛋白青饲料短缺问题,本研究将经品种品质比较试验筛选出的青贮玉米(Zea mays)‘金岭青贮10号’(乳熟末期)分别与不同生育期相遇的‘黔豆7号’(盛花期)、‘中黄16’(结荚末期)和‘HZ8009’(鼓粒末期)3个饲用大豆(Glycine max)品种(系)以质量比为0:4、1:3、 2:2、 3:1和4:0混合后,研究青贮玉米和饲用大豆混配后的饲用价值和潜力,分别测定粗蛋白(CP)、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量3个主要饲用品质指标,并利用熵权法的综合多指标决策分析方法 (TOPSIS)进一步对饲用品质和饲用价值进行综合分析和评价。结果表明,青贮玉米与不同时期饲用大豆品种(系)在不同混配比例下对饲用品质和饲用价值有不同程度的影响,且乳熟末期的金岭青贮10号与鼓粒末期的‘HZ8009’的质量混配比为3:1时,饲用价值较高。

摘要： 豆子发芽还能做豆浆由于没来得及处理,浸泡的豆子发了芽,这样的豆子还能用来打豆浆吗?答案是肯定的。豆浆不仅可以食用,而且对于老人和小孩儿来讲还特别适合。黄豆虽然营养价值高,但是其中的植酸和胰蛋白酶抑制剂会干扰铁、锌等矿物质和蛋白质的吸收。如果发芽长度不超过0.5厘米,发芽豆的植酸和胰蛋白酶抑制剂的含量更低,这就意味着,在同样烹调时间下,发芽豆的营养素利用率会明显增加。

摘要： 以13份国内外菜豆品种为植物材料,测定了其叶片和豆荚中植物凝集素、皂苷、胰蛋白酶抑制剂和植酸4种抗营养因子的含量或活性,并进行了相关性分析及聚类分析.结果表明,菜豆品种抗营养因子分布存在器官特异性,植物凝集素、胰蛋白酶抑制剂、皂苷主要分布在菜豆的豆荚中,植酸在叶片中分布较多.相关性分析得知菜豆的叶片和豆荚的4种抗营养因子的相关性均不显著.聚类分析将菜豆聚为4个品种群,品种群I抗营养因子含量较低,可用于低毒菜豆品种选育;品种群II抗营养因子含量中等;品种群III和Ⅳ抗营养因子含量较高,可用于提取纯化抗营养因子进行进一步研究,或用于抗虫转基因工程研究.

摘要： 决明胰蛋白酶抑制剂(Cassia obtusifolia trypsin inhibitor,CoTI)是植物Kunitz蛋白酶抑制剂家族的一个成员,对胰蛋白酶具有较强的抑制活性.利用同源建模预测CoTI的三维模型,发现其形成了β-三叶草型三维结构,由底部的β-桶与顶部的盖子区域组成.通过氨基酸序列和三维模型比对,发现CoTI含有一个保守的Trp114残基,该残基位于盖子区域,与β-桶的Leu98和Ser137形成氢键,其侧链伸向Barrel,和Val68、Leu98、Phe100等形成疏水作用,推测其在β-三叶草型三维结构的形成与稳定中发挥重要作用.使用定点突变技术将Trp114残基突变为Ala残基后,相比于野生型CoTI,CoTI Trp114Ala突变体对牛胰蛋白酶和菜青虫中肠类胰蛋白酶的抑制活性分别下降63.4％和62.0％,证明Trp114残基对发挥CoTI抑制活性的重要性.结果为CoTI的结构-功能研究及相关的应用奠定理论基础.

摘要： 研究添加不同比例(10%,20%和30%)苦荞粉的苦荞面包与普通小麦面包之间抗氧化性、体外消化性、胰蛋白酶抑制活性及感官品质的不同,选择适宜的苦荞添加量。结果表明,苦荞面包中黄酮、多酚、抗性淀粉的含量及胰蛋白酶抑制剂的活性均明显高于普通小麦面包,且随着苦荞添加量的增加,样品的抗氧化性和胰蛋白酶抑制剂活性增强。然而,随着苦荞添加量增加,消费者对产品的接受程度反而降低。综合分析面包的营养价值及感官品质,得出苦荞面包制作过程中苦荞粉的最适添加量为10%。

摘要： 目的 评价乌司他丁对幼鼠高氧急性肺损伤的影响及其与Wnt/β-连环素(β-catenin)信号通路的关系.方法 清洁级健康雄性SD大鼠36只,14日龄,体重40～ 50 g,采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、高氧致急性肺损伤组(ALI组)和乌司他丁组(UTI组).ALI组和UTI组采用吸入高浓度氧(氧浓度＞90％)72 h的方法制备幼鼠高氧急性肺损伤模型,C组正常呼吸空气.模型制备成功后1d时开始,UTI组每天同一时点腹腔注射乌司他丁50000 U/kg,连续注射3 d;C组和ALI组于相同时点腹腔注射等容量生理盐水.于模型制备成功后4d时处死大鼠取肺组织,确定湿重/干重(W/D)比值,光镜下观察病理学结果并行肺损伤评分,电镜下观察细胞超微结构,采用ELISA法检测IL-6、IL-1β和TNF-α.含量,采用Westem blot法检测磷酸化糖原合成激酶3β(p-GSK-3β)、Wnt3a和β-catenin的表达.结果 与C组比较,ALI组和UTI组肺组织W/D比值和肺损伤评分升高,肺组织IL-6、IL-1β和TNF-α含量、p-GSK-3β、Wnt3a和β-catenin表达水平升高(P＜0.05);与ALI组比较,UTI组肺组织W/D比值和肺损伤评分降低,肺组织IL-6、IL-1β和TNF-oα含量、p-GSK-3β、Wnt3a和β-catenin表达水平降低(P＜0.05).UTI组肺组织细胞超微结构损伤较ALi组减轻.结论 乌司他丁减轻高氧致幼鼠急性肺损伤的机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路激活,降低炎症反应有关.

摘要： 生大豆中的胰蛋白酶抑制因子具有保护作用,可防止大豆籽粒自身发生分解代谢,使种子处于休眠状态,能调节大豆蛋白质合成和分解,并具有抗虫作用,因而是大豆需合成分.大豆胰蛋白酶抑制剂是大豆中主要抗营养因子,是一种多肽类或蛋白质.本实验为探究辽宁省和黑龙江省大豆胰蛋白酶抑制剂活性的差异,分别从两个地区随机选取了14种和23种大豆样品,通过实验数据分析比较辽宁省和黑龙江省的大豆胰酶抑制剂活性的差异.结果表明,辽宁省大豆胰蛋白酶抑制剂活性比黑龙江省高,即抗营养作用强.

摘要： 以BAPNA为底物采用分光光度法能有效测定马铃薯块茎中的胰蛋白酶抑制剂的活力，检测波长为410nm，反应温度为37°C，反应时间为10min。从马铃薯块茎中提取的粗蛋白溶液其胰蛋白酶抑制剂活力为90.19 TIUs/mg(0.11mg/mg)，理论上每100 g马铃薯块茎中所含的胰蛋白酶抑制剂能抑制0.13g胰蛋白酶的活力。该方法不仅适合于马铃薯胰蛋白酶抑制剂的活力测定，对其他所有来源的胰蛋白酶抑制剂活力测定同样适用。

摘要： 葛根为豆科植物野葛的干燥块根,在我国分布较广泛,因其具有降血糖、抗氧化、抗肿瘤等特殊功效而备受关注.胰蛋白酶抑制剂为一类对蛋白酶有抑制作用的多肽或蛋白质,其能与相应的蛋白水解酶形成动态平衡,调节生物体内许多重要的生命活动.本文从天然植物葛根中分离获得一种具有生物活性的胰蛋白酶抑制剂,其安全性毋庸置疑,通过观察抑制剂的生物学活性判断是否具有抗肿瘤效果,为进一步实验提供基础.rn 实验利用阴离子交换色谱High Q、SDS-PAGE、质谱、等电聚焦等方法分离纯化获得葛根蛋白，命名为RPTI。经质谱分析其相对分子量为20731.6Da,等电点值为6.34,N-端氨基酸序列检测结果为:DFVYDMCGNVLNGGTYYIL，通过NCBI比对推测其为植物胰蛋白酶抑制剂。抑制活性实验以BANPA为底物，测得RPTI对底物具有明显的抑制性。选取30-100°C温度范围测试RPTI对温度的稳定性，结果表明 RPTI具有较高耐热性，70°C条件下完全失活。调节pH范围4-7，检测RPTI对pH变化的稳定性，结果表明酸碱对RPTIi并无显著影响，pH8为相对最大活性值。rn 文献中提及胰蛋白酶抑制剂具有抗癌功效，因此本实验选取正常肝细胞L-02与肝癌细胞Hep-G2做对比实验，体外细胞实验结果表明，RPTI对正常肝细胞L-02并无毒性，而RPTI对肝癌细胞Hep-G2却有明显的抑制生长作用，最大抑制率达到85%，此时RPTI浓度为0.5mg/mL.因此本实验验证RPTI对肝癌细胞Hep-G2具有抑制作用，但并不适用于所有癌细胞，对RPTI的抗癌效果还需选取多类型癌细胞株进一步实验验证。rn 葛根为家喻户晓的药食同源物质，本实验成功从天然植物葛根中分离纯化获得一种具有生物学活性的胰蛋白酶抑制剂，为葛根入药及其药用功能提供基础依据，中医上葛根多用于复方中，因此对复方新用提供一定依据。

摘要： 目的:获得中国红小豆(Vigna angularis)栽培品种胰蛋白酶抑制剂(TI)的含量、多型性及稳定性,为其科学利用提供依据. 方法:采用抑制胰蛋白酶活性及明胶-PAGE活性显色方法对中国17种红小豆栽培品种TI的含量、多型性及酸热稳定性进行分析. 结果:中国红小豆栽培品种TI含量范围为236.0～541.1TIU/g,平均含量为410.8TIU/g;京农21、辽引红豆、XD1含量最高,分别为541.1、531.5、528.3TIU/g.红小豆有7种TI(A1-A7),以A4为主,A2、A6次之;品种间TI数量、丰度存在一定差异,产地北京的京农21有A2,产地吉林白城的A2含量极低.红小豆TI提取液经沸水处理30min或piH1.5处理5h可以保持90％以上的活性,明胶-PAGE活性染色亦表明有酶活性. 结论:红小豆TI含量较高,平均达410.8TIU/g;红小豆有7种TI,品种间TI数量、丰度存在一定差异;红小豆TI耐热耐酸,沸水处理30min或pH1.5处理5h可以保持90％以上的活性.

摘要： AP最主要的发病机制为“胰酶激活学说”，即各种原因导致胰管梗阻，胰腺防御机制受到破坏，胰蛋白酶原被激活，后者启动各种酶原活化的级链反应，包括磷脂酶A、激肽释放酶、弹性蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶等，导致胰腺及其临近组织炎症、水肿、出血、坏死等改变，并可引起全身多脏器损害。胰酶激活在AP发病机制中发挥至关重要的作用，故临床上以胰蛋白酶抑制剂作为治疗AP的关键药物，通过抑制胰酶活化治疗AP。目前临床上应用的胰蛋白酶抑制剂主要包括乌司他丁、生长抑素、奥曲肽、加贝酯。治疗AP的胰蛋白酶抑制剂种类较多，至于何种药物最有效，目前并无定论。一些研究显示，联合治疗效果显著显著，如乌司他丁（或加贝酯）与奥曲肽（或生长抑素）联合治疗AP。胰蛋白酶抑制剂联合其他多种药物治疗可显著降低AP的病死率。此外，氧自由基清除剂、血管活化因子、前列腺素族、胆囊收缩素受体拮抗剂等药物也具有胰酶抑制作用，但临床效果有待于进一步证实。

摘要： 目的:获得中国红小豆(Vigna angularis)栽培品种胰蛋白酶抑制剂(TI)的含量、多型性及稳定性,为其科学利用提供依据. 方法:采用抑制胰蛋白酶活性及明胶-PAGE活性显色方法对中国17种红小豆栽培品种TI的含量、多型性及酸热稳定性进行分析. 结果:中国红小豆栽培品种TI含量范围为236.0～541.1TIU/g,平均含量为410.8TIU/g;京农21、辽引红豆、XD1含量最高,分别为541.1、531.5、528.3TIU/g.红小豆有7种TI(A1-A7),以A4为主,A2、A6次之;品种间TI数量、丰度存在一定差异,产地北京的京农21有A2,产地吉林白城的A2含量极低.红小豆TI提取液经沸水处理30min或pH1.5处理5h可以保持90％以上的活性,明胶-PAGE活性染色亦表明有酶活性. 结论:红小豆TI含量较高,平均达410.8TIU/g;红小豆有7种TI,品种间TI数量、丰度存在一定差异;红小豆TI耐热耐酸,沸水处理30min或pH1.5处理5h可以保持90％以上的活性.

摘要： 目的：研究纯化的半夏胰蛋白酶抑制剂(Rhizoma pinelliaetrypsin inhibitor，RPTI)对大鼠胃溃疡与胃液分泌量的影响。rn 方法：应用以胰蛋白酶为配体的亲和层析法，从半夏蛋白粗提液的40%,的硫酸铵(M/V)沉淀中分离纯化RPTI，应用Edman降解法分析其N.端氨基酸序列；应用水浸一束缚应激模型检测RP了I对大鼠胃溃疡的影响。rn 结果：经SDS-PAGE检测，纯化的RPTl分子量为14kD左右，N端6个氨基酸残基顺序为DPVVDG；RP71200、100和50mg·kg-1 jg对大鼠水浸应激性胃溃疡具有明显的抑制作用，且呈现较好的量效关系，平均溃疡抑制率可达16.6％~54.9％；高剂量的RPTI(ig 200mg·kg-1)可以极显著抑制实验大鼠胃液的分泌。rn 结论：RPTI对大鼠应激性胃溃疡与胃液的分泌具有抑制作用。

摘要： 胰蛋白酶抑制剂(TI)是一种重要的生化药物和生化试剂，广泛存在于动、植物和微生物中。此外,许多研究报道，癌细胞的侵袭、转移与胰蛋白酶有很大的关系，外加胰蛋白酶抑制剂或诱发生成内源性胰蛋白酶抑制剂可以抑制癌细胞的生长,达到治疗肿瘤的作用。因此寻找及利用胰蛋白酶抑制剂是极具研究意义的。有鉴于此，本文从新疆本地产的一种无种皮南瓜籽中分离到了胰蛋白酶抑制剂，并对其部分性质进行了研究，包括分子量、热稳定性及PH稳定性等。

摘要： 化学合成的小分子胰蛋白酶抑制剂,反式4-胍甲基环己烷酸(trans-4-guanidinomethylcyclohexanecarboxylic acid,GMCHA)和4-胍基苯甲酸(4-guanidino benzoic acid,GBA)的芳香酯能以某种未知机理抑制包括大肠杆菌在内的众多革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌的生长,同时它们又是大肠杆菌中两个类胰蛋白酶oligopeptidase A(OpdA)和oligopeptidase B(OpdB)的体外抑制剂.对OpdA和OpdB缺失突变体的研究表明这两种类胰蛋白酶都不是GMCHA及GBA类抑菌剂在大肠杆菌细胞内的主要作用靶点.经GMCHA及GBA类抑菌剂处理过的大肠杆菌,经普通SDS-PAGE就能看到明显的菌体蛋白电泳条带的变化,对这两类抑制剂作用后的大肠杆菌作进一步的蛋白质组学分析将有助于阐明这类潜在抗生素的作用机理.

摘要： 目的：考察自主设计合成的小分子化合物(ZCL-8)对创伤性胰腺炎大鼠的保护作用. 方法：利用气流冲击法建立创伤性胰腺炎大鼠模型,以大鼠的存活率、血清淀粉酶和脂肪酶活性以及胰腺组织病理学改变情况为考察指标,以加贝酯为对照药,评价ZCL-8在造模后1h腹腔注射给药后对创伤性胰腺炎大鼠的治疗作用. 结果：与模型组相比,ZCL-8可显著降低血清淀粉酶(2466.7±733.5Vs.5300.4±802.1)和脂肪酶水平(345.9±50.5Vs.703.4±114.7),胰腺组织损伤明显减轻,同时提高了创伤性胰腺炎大鼠的生存率(70％Vs.40％);相比加贝酯,ZCL-8给药后大鼠的生存率更高(70％Vs.50％),血清淀粉酶(2466.7±733.5Vs.3708.4±777.6)和脂肪酶水平更低(345.9±50.5Vs.470.8±49.4). 结论：小分子化合物ZCL-8对创伤性胰腺炎大鼠具有明显的治疗作用,值得进一步研究.

摘要： 本发明提供了制造和使用具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的方法；其中n是在1和2之间的整数，含1和2；m是在0和2之间的整数，含0和2；X选自由CH或N组成的组；R

摘要： 本发明提供了一种从中药中筛选SARS冠状病毒主蛋白酶抑制剂的方法以及由此方法筛选出的抑制剂。筛选方法包括如下：A.测定来自单味中药的多种提取物的SARS冠状病毒主蛋白酶体外抑制活性；B.选择具有最好的体外抑制活性的一种提取物；和C.对步骤B所选择的提取物进行至少一轮的分离和选择。本发明筛选出的化合物对SARS冠状病毒主蛋白酶具有体外抑制活性，是极佳的可能上市的药物或潜在的药物前体。

摘要： 提供一种用于抑制弹性蛋白酶的口服组合物及其应用、弹性蛋白酶抑制剂、以及口服摄入弹性蛋白酶抑制剂的弹性蛋白酶活性抑制方法，所述口服组合物用于使因紫外线、活性氧等外在因素、生物体的代谢功能降低等而产生的生物体组织中的弹性蛋白的降低恢复、改善皮肤的衰老症状等。一种用于抑制弹性蛋白酶的组合物，其特征在于，含有咖啡黄葵(Abelmoschusesculentus)的种子的加工物或来源于咖啡黄葵的种子的特定化合物作为有效成分。

摘要： 本发明提供了制造和使用具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的方法；其中n是在1和2之间的整数，含1和2；m是在0和2之间的整数，含0和2；X选自由CH或N组成的组；R

摘要： 本发明主要涉及菠萝蛋白酶，尤其涉及该复杂的蛋白质混合物所含有的活性化合物。本发明提供了重组表达的菠萝蛋白酶中含有的菠萝蛋白酶抑制剂前体和菠萝蛋白酶抑制剂。已经发现，重组表达的抑制剂在治疗疾病和状态上的效果优于来源于植物提取物的菠萝蛋白酶或者它的蛋白组分。

摘要： 本发明涉及一种式I或式Ia化合物或其药学上可接受的盐，其抑制丝氨酸蛋白酶的活性，特别是抑制丙型肝炎病毒NS3-NS4A蛋白酶的活性。象这样，它们通过干扰丙型肝炎病毒的生活周期来起作用，可用作抗病毒剂。本发明还涉及包含所述化合物的药学可接受的组合物，其离体使用或对遭受HCV感染的患者给药，和制备这些化合物的方法。本发明还涉及通过给患者服用包含本发明化合物的药物组合物来治疗HCV感染的方法。

摘要： 本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种豇豆胰蛋白酶抑制剂基因、及其应用、大量制备豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法。如上所述本发明的发明人首先利用PCR反应从豇豆基因组DNA中直接获得CPTI基因(CPTI基因不含有内含子)，然后优化改造所述CPTI序列，改造后的序列在大肠杆菌中的表达量和表达比活性都有显著改进。

摘要： 本发明公开了一种重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂BTI突变体，命名为e‑BTI，其特征在于，根据BTI的基因序列，设计突变引物，对BTI的S41T以及P44T位点进行突变得到。本发明制得的e‑BTI热稳定性明显高于BTI，而且显示出优异的和胰蛋白酶的特异亲和性。可以采用所述e‑BTI制备胰蛋白酶亲和材料用于分离、提纯和鉴定胰蛋白酶。本发明采用简单的方法制得重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂突变体e‑BTI，并且采用其突变体得到的胰蛋白酶亲和材料对胰蛋白酶的选择性吸附高、非选择性吸附低，利用不同洗脱液对胰蛋白酶吸附和分离，经过一步纯化便可得到高纯度的目的胰蛋白酶，最终纯化得到的胰蛋白酶具有高的催化活性。

摘要： 本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种豇豆胰蛋白酶抑制剂基因、及其应用、大量制备豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法。如上所述本发明的发明人首先利用PCR反应从豇豆基因组DNA中直接获得CPTI基因(CPTI基因不含有内含子)，然后优化改造所述CPTI序列，改造后的序列在大肠杆菌中的表达量和表达比活性都有显著改进。

摘要： 本发明公开了一种重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂BTI突变体，命名为e‑BTI，其特征在于，根据BTI的基因序列，设计突变引物，对BTI的S41T以及P44T位点进行突变得到。本发明制得的e‑BTI热稳定性明显高于BTI，而且显示出优异的和胰蛋白酶的特异亲和性。可以采用所述e‑BTI制备胰蛋白酶亲和材料用于分离、提纯和鉴定胰蛋白酶。本发明采用简单的方法制得重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂突变体e‑BTI，并且采用其突变体得到的胰蛋白酶亲和材料对胰蛋白酶的选择性吸附高、非选择性吸附低，利用不同洗脱液对胰蛋白酶吸附和分离，经过一步纯化便可得到高纯度的目的胰蛋白酶，最终纯化得到的胰蛋白酶具有高的催化活性。