一种基于Red的在大肠杆菌中修饰染色体和BAC的新型重组工程系统

摘要

近5年来兴起了一种新型的基于λ-噬菌体Red重组系统的重组工程技术,它将缺陷型λ-噬菌体整合入大肠杆菌染色体上,使3种重组酶蛋白Exo、Beta和Gam的表达受到严格的调控.Red重组工程技术不受酶切位点的限制,只需用35～50 bp长的同源臂就能得到很高的重组效率.运用这种技术能在大肠杆菌体内通过同源重组对大肠杆菌染色体、BAC质粒等复杂DNA片段上的基因进行突变、敲除、替换等修饰;此外可运用该技术中缺口修复的方法构建质粒.Red重组工程技术有远大的应用前景,将极大地推动功能基因组研究的进展.