抗T-2毒素单克隆抗体的制备及特性

摘要

目的:建立敏感、特异和快速的针对T-2毒素的ELISA检测方法,形成具有我国自主知识产权的快速检测试剂盒.方法:利用B细胞杂交瘤技术,建立抗T-2毒素的单克隆杂交瘤细胞株.结果:用T-2-羊免疫球蛋白(T-2-GIgG)偶联物免疫8～10周龄雌性BALB/c小鼠后,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0融合,经过3～4次亚克隆建立了2个稳定分泌抗T-2毒素抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A7和6E4.将上述2株杂交瘤细胞分别注入BALB/c小鼠腹腔,获得含抗T-2毒素单克隆抗体的腹水,并将腹水用饱和硫酸铵法进行纯化,得到2A7和6E4单克隆抗体.两株单克隆抗体的Ig亚类为IgG1, 腹水中抗体的滴度分别为6.4×106和1.1×107,参考工作浓度分别为1.0×106和3.2×106.纯化后2A7抗体的IgG含量为16.4 g/L,亲和常数为8×10-8mol/L.2A7抗体与其他结构类似物无交叉反应,具有较高的特异性.结论:制备了具有高特异性和亲和力的抗T-2毒素单克隆抗体,初步建立了针对T-2毒素的ELISA检测方法.