hTERT启动子调控caspase 3基因的特异性表达及其抑癌作用

摘要

目的:探讨端粒酶催化亚基(hTERT)启动子调控caspase 3(半胱天冬酶-3)基因在端粒酶阳性肿瘤细胞中表达的特异性及在体内外的抑癌作用.方法:构建hTERT启动子调控的caspase 3基因的真核表达载体,通过RT-PCR、瞬时转染、MTT法、流式细胞术和动物实验方法,检测hTERT启动子调控caspase 3基因表达对肿瘤细胞生长的影响.结果:hTERT启动子调控caspase 3基因在端粒酶阳性肿瘤细胞HepG2中有明显表达,而在正常人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast,HEL)中未见表达;caspase 3表达能对端粒酶阳性肿瘤细胞HepG2、HeLa、Glc和A549细胞的增殖产生明显抑制作用,抑制率为10.5%～37.9%;同时也可以诱导HepG2、HeLa、Glc和A549细胞发生凋亡,凋亡率为15.39%～35.19%;而对端粒酶阴性的正常细胞HEL没有明显的影响.动物实验结果显示,hTERT启动子调控的caspase 3基因转染对HepG2细胞的体内增殖具有抑制作用.结论:hTERT启动子调控的caspase 3基因表达载体是一种有应用潜力的肿瘤基因治疗载体.