姜黄素通过调控Notch1通路对人子宫内膜癌ISH细胞株孕激素治疗敏感性的影响

摘要

目的探讨姜黄素是否能通过调控Notch1信号通路逆转人子宫内膜癌ISH细胞株孕激素治疗耐药性。方法醋酸甲羟孕酮(MPA)浓度递增及长期持续作用,建立人子宫内膜癌孕激素耐药细胞株ISH/MPA,MTS法检测细胞耐药指数,绘制ISH/MPA细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间。不同浓度姜黄素(0、7.5、15、30、60μmol/L)处理ISH/MPA细胞,MTT法检测细胞存活率。ISH/MPA细胞分为ISH/MPA组、姜黄素组、激动剂组、激动剂+姜黄素组,姜黄素组加入30μmol/L姜黄素、激动剂组加入2μmol/L NSC 22423、激动剂+姜黄素组加入30μmol/L姜黄素和2μmol/L NSC 22423,ISH/MPA组细胞不做处理,培养48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白印迹法检测Notch1、Jagged1、Hes-1蛋白表达。结果ISH/MPA细胞耐药指数随MPA浓度增加而升高,且MPA浓度为10μmol/L时,ISH和ISH/MPA细胞群体倍增时间无统计学差异,两者生长曲线基本一致。不同浓度姜黄素均降低ISH/MPA细胞存活率,且随姜黄素浓度增加而升高(P<0.05)。与ISH/MPA组比较,姜黄素组细胞凋亡率升高,Notch1、Jagged1和Hes-1蛋白表达降低,激动剂组细胞凋亡率降低,Notch1、Jagged1和Hes-1蛋白表达升高(P<0.05);与姜黄素组比较,激动剂+姜黄素组细胞凋亡率降低,Notch1、Jagged1和Hes-1蛋白表达升高(P<0.05);与激动剂组比较,激动剂+姜黄素组细胞凋亡率升高,Notch1、Jagged1和Hes-1蛋白表达降低(P<0.05)。结论姜黄素提高ISH细胞对MPA的敏感性,其可能是通过抑制Notch1/Jagged1/Hes-1信号通路发挥作用。