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miR-224-5p通过靶向SMAD5对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的调控作用

     

摘要

目的 探讨miR-224-5p对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的作用及机制.方法 RT-qPCR检测弥漫大B细胞淋巴瘤组织和细胞中miR-224-5p与SMAD5 mRNA的表达.利用Lipofectamine 2000将miR-NC、miR-1224-5p mimic、miR-224-5p inhibitor、pc-SMAD5质粒分别或联合转染进入U2932细胞分别记为miR-NC组、miR-1224-5p mimic组、miR-224-5p inhibitor组,未转染正常培养的U2932细胞记为Control组.MTT法检测细胞生长,克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、SMAD5蛋白相对表达量,双荧光素酶报告检测靶向关系.结果 miR-224-5p在弥漫大B细胞淋巴瘤组织和细胞中均明显下调.与Control组相比,miR-224-5p mimic组U2932细胞吸光值和克隆细胞数目明显减少、细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax表达明显升高、Bcl-2表达明显降低(P<0.01),miR-224-5p inhibitor组U2932细胞吸光值和克隆细胞数目明显增加、细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax表达明显降低、Bcl-2表达明显升高(P<0.01).miR-224-5p靶向下调SMAD5.共转染pc-SMAD5后逆转miR-224-5p对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的作用.结论 miR-224-5p过表达靶向SMAD5抑制弥漫大B细胞淋巴瘤U2932细胞增殖并诱导其凋亡.

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