miR-598靶向FGFR2对乳腺癌细胞增殖、凋亡及糖代谢的调控作用

摘要

目的:探讨miR-598通过靶向FGFR2基因对乳腺癌细胞增殖、凋亡及糖代谢的影响.方法:检测乳腺癌组织和多种乳腺癌细胞中miR-598的表达.miR-598模拟物(mimic)和pcDNA-FGFR2质粒分别或共转染乳腺癌MCF-7细胞,构建过表达体系.将细胞分为4组:对照组、miR-598 mimic组、pcDNA-FGFR2组和mimic+FGFR2组.qRT-PCR检测miR-598和FGFR2的表达.生物信息学软件预测miR-598和FGFR2结合位点.双荧光素酶报告基因实验验证miR-598和FGFR2的靶向关系.克隆形成实验检测细胞增殖.JC-1实验检测细胞线粒体膜电位变化.试剂盒检测葡萄糖摄入量和乳酸生成量.Western blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达.结果:乳腺癌组织中miR-598的表达显著低于癌旁组织(P<0.05),且乳腺癌细胞系(MCF-7、MDA-MB-231和HCC1937)中miR-598的表达显著低于乳腺正常细胞系Hs 578Bst(P<0.05).实验证实FGFR2为miR-598的靶基因,miR-598与FGFR2的表达呈负相关.miR-598过表达逆转了高水平FGFR2导致的克隆形成率的升高(P<0.05).miR-598过表达逆转了高水平FGFR2导致的线粒体膜电位红绿荧光比例的升高(P<0.05)及凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2、Caspase-3和Caspase-9表达的降低(P<0.05).miR-598过表达逆转了高水平FGFR2导致的葡萄糖摄入量和乳酸生产量的增加(P<0.05).结论:miR-598通过靶向FGFR2抑制乳腺癌细胞增殖,加速线粒体膜电位去极化,促进细胞凋亡并且抑制细胞糖代谢.