中性粒细胞防御素抗SARS冠状病毒研究

摘要

目的检测人和兔中性粒细胞防御素的抗SARS冠状病毒活性,探讨防御素在SARS发生发展过程中的作用.方法应用酸-尿素-聚丙烯酰胺凝胶洗脱电泳(CAU-PAGE)从人和兔中性粒细胞中分别纯化人中性粒细胞防御素(HNP1-3)和兔中性粒细胞防御素(RNP1-5),通过微量培养法观察不同浓度防御素对SARS冠状病毒BJ01株感染Vero-E6细胞及病毒复制的影响.结果用CAU-PAGE分离的HNP1-3和RNP1-5经15%SDS-PAGE电泳后在分子量4 000左右呈现单一条带,HNP1-3经ELISA定量检测确认.HNP1-3和RNP1-5的抗大肠杆菌(ATCC25922菌株)活性的IC50分别在25～50μg/ml和5～10μg/ml之间,保持了天然的抗菌活性.在抗SARS冠状病毒实验中,HNP1-3和RNP1-5在25～100μg/ml浓度时,不能阻断SARS冠状病毒致细胞病变效应(CPE),也不能抑制SARS冠状病毒在Vero-E6细胞中的复制.结论天然防御素HNP1-3和RNP1-5对SARS冠状病毒没有抑制和杀灭活性,可能提示家兔和人对SARS冠状病毒不具备天然免疫力.